甘草鲨烯合成酶基因的分离及植物表达载体的构建.pdfVIP

药 　物 　生 　物 　技 　术 Phar maceutical Biot echnolo gy 　2007 ,14 (4) :255～258 255 甘草鲨烯合成酶基因的分离及植物表达载体的构建 1 2 2 1 卢虹玉 ,刘敬梅 ,阳文龙 ,高山林 ( 1. 中国药科大学 , 江苏 南京 2 10038 ;2 . 国家作物分子设计中心 ,北京 100085) ( ) ( 摘 　要 　采用 R TPCR 技术从乌拉尔甘草 Gly cy r rhiz a u ralens is 中克隆甘草鲨烯合成酶 Squalene Syn ) t ha se ,SS 基因 ,并通过酶切连接的方法构建相关植物表达载体 。结果表 明 , 两个 SS 基 因编码 区长分别为 ( 1242bp 、1239bp ,分别编码 4 12 、4 13 个氨基酸残基的多肽 ,与 Haya shi 等报道的光果甘草两个 SS 基因 GgSQ S1 和 Gg SQ S2) 同源 性 高达 98 % , 分 别 命 名 为 Gu SQ S1 和 Gu SQ S2 ( GenBank 登 录 号 分 别 为 : A M 182329 , A M 182330) ;植物表达载体构建的鉴定结果表明 , 已将 Gu SQ S1 和 Gu SQ S2 序列分别正向插入到双 TDN A 表 达载体中的 CaMV 35 S 启动子和 N O S 终止子之 间 , 重组质粒分别命名为 130/ 35 SGu SQ S1 和 130/ 35 S Gu SQ S2 ,为今后的次生代谢基因工程研究奠定基础 。 关键词 　乌拉尔甘草 ;甘草酸 ;鲨烯合成酶 ;基因克隆;双 TDN A 表达载体 中图分类号 :Q78 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :100589 15 (2007) ( ) ( 　　甘草 Gly cy r rhiz asp . 是豆科 L eg um i no s ae) 甘草属植物 , 是我 国重要 的传 统 中草药 。 甘草属植物含有多种化学成分 , 其 中被公认 的 有效成分主要是三萜类化合物和黄酮类化合 ( 物 。其中三萜皂苷类化合物甘草酸 Glycyrr hizic ) ( ) acid ,又称甘草甜素 Glycyrrhizin 具有抗菌消 炎 、镇咳 、抗溃疡 、解毒 、抗病毒 、抗癌等生理活 性 。现代药理研究发现 , 甘草酸及其水解产物 甘草次酸类药物具有防治病毒性肝炎 、高血脂 症 、癌症及抑制 SA R S 冠状病毒 的作用[ 1 ] 。另 Fig 1 　Bio synt hesi s Pat hway s of Trit erp enoid in Licorice 外甘草酸还是一种天然 的甜味剂 , 被广泛应用 ( ) 于食品工业 。