高效液相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析中的应用.pdfVIP

第34卷 分析化学 (FENXIHUAXUE)评述与进展 第3期 2006年3月 ChineseJournalofAnalyticalChemistry 427-432 高效液相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析中的应用 田 芹 毕承路 任丽萍 汪丽萍 周志强* (中国农业大学理学院应用化学系，北京100094) 摘 要 对近年来高效液相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析中的应用进展进行综述，简单介绍了高 效液相色谱圆二色检测器的原理和特点，着重介绍了非手性色谱条件下圆二色检测技术在手性化合物对映 体纯度测定、复杂基质中手性化合物分析以及在手性化合物绝对构型侧定中的应用，并讨论了它的应用前景。 关扭词 高效液相色谱，圆二色检测器，手性，综述 1 引 言 手性是自然界的本质属性之一，是大分子和分子水平呈现多种现象的源泉。在生物化学和药物化 学行为中，手性药物异构体之间存在着明显的代谢和药理作用的差别，因此对映异构体的分析对分子立 体化学和生物毒性的研究具有重要意义。多年来国内外学者建立了许多分离纯化手性物质的方法，其 中最常见的方法是借助于手性固定相、手性试剂或手性流动相来达到分离分析的目的，这些方法因手性 固定相、手性试剂和手性流动相的种类和数量受到很大的限制，并且分析的条件、分析步骤、外来干扰等 对实验的结果会产生很大影响，因此产生了可以用普通分析手段检测手性化合物的手性光学方法 (Chiraopticalmethod)，实现该方法的手性检测器有旋光检测器(Polarimetricdetector)、旋光色散检测器 (OpticalrotationdispersiondetectorORD)和圆二色检测器(CirculardichroismdetectorCD)[]。旋光检测 器和旋光色散检测器是利用左、右圆偏振光在被测物介质中折射率不同的基础上建立起来的[[21，检测 受温度和溶剂的变化影响大，很难做到梯度洗脱，但是对旋光活性化合物而言，是通用型检测器(不需 生色团);而圆二色检测器是在对左、右圆偏振光吸收能力不同的基础上建立起来的，克服了旋光检测 器和旋光色散检测器的缺点，比它们有更高的灵敏度和选择性[[31，近些年得到了学者的关注。1980年， Drake等[41首次使用圆二色检测器，在液相色谱上实现了手性化合物的分离及纯度的测定，从此高效液 相色谱圆二色检测技术在手性化合物分析上得到不断发展，现已成为手性化合物分析的有力工具[(5,610 本文从高效液相色谱圆二色检测技术的原理和特点人手，分析讨论了其应用进展，并展望了其应用前景。 2 圆二色检测的检测原理及特点 当一束平面偏振光通过光学活性物质时，由于左右圆偏振光的折射率不同，偏振面将旋转一定的角 度，这种现象称为旋光(Opticalrotation)，偏振面旋转的角度称为旋光度。若光学活性物质含有生色团 对左、右圆偏振光的吸收能力也不同，则造成通过的左、右圆偏振光不仅速度不同，而且振幅也不一样。 因此，叠加产生的偏振光将不再是平面偏振光，而是椭圆偏振光，这种现象称为圆二色性。圆二色检测 器的响应信号与旋光物质对左、右圆偏振光的吸收差成正比，圆二色性与波长有关，以偏振光的吸光度 差△e为纵坐标，波长A为横坐标做图，便得到圆二色谱图。由于△e绝对值很小，常用摩尔椭圆度 0〔] 代替，其中0【]=330OAe。当圆二色检测器与液相色谱联用时，一般来讲，对于单一对映体，在色谱图中 可能出现正峰或负峰;而外消旋体不出峰，如果对映体含量不同，则色谱图上表现出的是占优势百分含 量对映体的信号峰(图1)。 圆二色检测器选择性高，只对旋光活性化合物有响应，而无旋光活性的化合物不干扰测定;检测器 在温度和溶剂变化时比较稳定，具有梯度兼容性;另外，圆二色检测器与其他检测器的结合使用，能在部 2005-05-16收稿;2005-06-23接受 分析化 学 第34卷 分或无手性分离条件下测定对映体的纯度，大大降低了分 米一冒一 离要求;圆二色谱图包含信息量大，结果更直接。 且_少一