气相色谱法测定月见草油脂肪酸组成.docVIP

气相色谱法测定月见草油脂肪酸组成 一、实验目的 掌握气象色谱仪的结构和仪器的操作 掌握气相色谱的定量分析方法 掌握归一化方法的应用 二、实验原理 仪器基本结构---框线图—说明各部分的作用 色谱分析原理 （1）定性分析：采用保留时间定性-----有标样 定量分析：可用归一化计算方法的条件----及公式 归一化法 应用归一化法的前提条件是试样中各组分必须全部流出色谱柱，并在色谱图上都显示色谱峰。若试样中有n个组分，每个组分的量分别为m1、m2…mn，则其中组分i的百分含量Xi按下式计算： 归一化法的优点是简便、准确，当操作条件如进样量、载气流速等变化时对结果影响较小。 （2）脂肪酸测定的原理 由于脂肪酸挥发性低，为此不能直接用气相色谱测定，需将脂肪酸进行甲酯化后用气相色谱分析。然后利用归一化法测定样品中各脂肪酸含量。 脂肪酸甲酯化原理为: 有机酸与甲醇在三氟化硼催化剂的存在下加热，可发生酯化反应，生成有机酸甲酯： 三、仪器及试剂 仪器：日本岛津公司ShimadazＧＣ－２０１０气相色谱仪。 试剂：三氟化硼-乙醚溶液，甲醇，正己烷均为分析纯。 四、实验步骤 1.样品的处理 甲酯化：取月见草油0.2ml于试管中，加0.5mol/ml氢氧化钾-甲醇溶液1.0ml，摇匀，在60°C水浴中反应30min。取出冷却至室温后，加入3ml 14%三氟化硼-甲醇溶液，摇匀，在60°C水浴中加热3min，冷却至室温后，加入1ml正己烷萃取，上层溶液用于气相色谱分析。 2.气相色谱分析条件 CBP-N12-010毛细管色谱柱（12.0m×0.10mm×0.1μm）； 氢火焰检测器； 气化室温度：230℃；检测器温度270℃；柱箱温度180℃； 分流比100:1； 载气：N2气，柱流速：1.0mL/min；总流速：30mL/min； 进样量：0.4μl。 3.仪器操作步骤 仪器具体操作步骤： 根据保留时间对样品中的脂肪酸进行定性，然后利用归一化方法进行各脂肪酸含量的计算。 五、实验结果及数据处理 油酸的分子式CH3(CH2)7CH=CH(CH2)7COOH 亚油酸的分子式CH3（CH2）4CH＝CHCH2CH=CH（CH2）7COOH 亚麻酸甲酯分子式：CH3CH2(CH＝CHCH2)3(CH2)6COOCH3 棕榈酸 六、注意事项