离子注入选育霉酚酸高产菌株及其发酵条件研究.pdfVIP

卷 期 ! # 微 生 物 学 报 !（）： # ’ ( ’) 年 月 日 $%% % ! !#$ %’()(*(+$ ,-$ ! *+,-./0 $%% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 离子注入选育霉酚酸高产菌株及其发酵条件研究 ， $ $ $ $ 刘 梅 ，张 鹏 ，崔晓兰 ，任 晓 ，张 华 （北京化工大学生命科学与技术学院 北京 %%%$) ） $ （华北制药集团新药研究开发中心国家微生物药物工程研究中心 石家庄 %#%%# ） 摘 要：离子注入技术是 世纪 年代兴起的一种综合诱变技术，其应用于生物工程已取得了丰硕成果，但在霉 $% ’% 酚酸产生菌的诱变育种中的应用还未见报道。短密青霉菌（ ） 是从土壤中分离得到的 !#$%$$’( )*+$%,(- .%/’( G7# GH2 产生菌I71 经过紫外线、微波等诱变处理得到的。为获得霉酚酸的高产工业菌株，进一步对该菌株进行了离 子注入诱变处理。用 氮离子分 个剂量进行处理，结果显示，随离子注入剂量增加，存活率呈现较明显的下 #J/K # 降上升 下降的“马鞍型”变化趋势。在剂量为 1 $ 时，菌株变异率及正变率均最高，分别达到 7 7 !% L $ M L % -?NO +: ’’ M) P 和1 M! P 。用QHRS 定量测定发酵液中霉酚酸的含量，筛选到产霉酚酸能力提高1% M P 的突变株G71。经 过连续传代试验，其遗传性状稳定。对发酵条件的优化结果显示最佳种龄为 ；用正交试验方法对发酵培养基中 $! 的碳、氮源进行优化，得到较优配方。突变株G71 在最优发酵条件下，霉酚酸摇瓶发酵单位可达$’) @T:R。野 ! 生菌株 的 产量为 ，经过 代诱变育种及发酵条件优化，产量提高了 倍。 I71 GH2 11 @T:R # $% M$