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第 65 卷 第 9 期 化 工 学 报 Vol.65 No.9 2014 年 9 月 CIESC Journal September 2014 基于基因组重排技术的多杀菌素高产菌株选育 1,2 2 2 3 2 2 1 夏燕春 ，王超 ，陈园 ，吴江磊 ，邹球龙 ，张晓琳 ，李春 1 （石河子大学化学化工学院/新疆兵团化工绿色过程重点实验室-省部共建国家重点实验室培育基地，新疆 石河子 832003； 2 3 国家粮食局科学研究院，北京 100037 ； 武汉轻工大学生物与制药工程学院，湖北 武汉 430023 ） 摘要：利用课题组前期通过不同物理化学诱变和分子生物学方法获得的 8 株多杀菌素产生菌为出发菌株，采用 96 孔板发酵培养结合生物检测的高通量筛选方法，探索了原生质体制备、再生、双亲灭活和原生质体融合等条件， 并通过多轮基因组重排获得了多杀菌素高产菌株。结果表明：当菌龄为 65 h、溶菌酶浓度为4 mg ·ml−1，39℃处 理时间 20 min 时，原生质体的制备率及再生率分别为 92.30%和 7.66% ；60℃恒温水浴 90 min 以上和紫外照射200 s 以上为双亲灭活条件；PEG 浓度为 50%，在 32℃下处理 15 min 时，原生质体融合率约为 1.18%。最终获得 1 株 产量较出发菌株提高了 36.07%且遗传稳定的融合株。 关键词：多杀菌素；刺糖多孢菌；原生质体融合；基因组重排育种 DOI ：10.3969/j.issn.0438-1157.2014.09.036 中图分类号：S 482.3+9 文献标志码：A 文章编号：0438—1157 （2014 ）09—3576—07 Enhanced production of spinosad with strains of Saccharopolyspora spinosa by genome shuffling 1,2 2 2 3 2 2 1 XIA Yanchun , WANG Chao , CHEN Yuan , WU Jianglei , ZOU Qiulong , ZHANG Xiaolin , LI Chun 1 （School of Chemistry and Chemical Engineering/Key Laboratory for Green Process of Chemical Engineering of Xinjiang Bingtuan, Shihezi University, Shihezi 832003, Xinjiang, China; 2Academy of State Administration of Grain, Beijing 100037, China; 3School of Biology and Pharmaceutical Engineering, Wuhan Polytechnic University, Wuhan 430023, Hubei, China ） Abstract: In this study, genome shuf