植酸酶及其热稳定性研究进展.pdfVIP

维普资讯 中 国 生 物 工 程 杂 志 第 23卷第 5期 CHINAB10IECHN0LOGY 2003年 5月 植酸酶及其热稳定性研究进展 邢自力 陈华友 谢 芳 吴自荣 (华东师范大学生命科学学院分子生物学实验室 上海 200062) 摘要 植酸酶能降解植物性饲料 中的植酸盐类 ，释放 出无机磷酸，对于提高饲料 中磷 的利用率， 减轻畜禽高磷排泄物对环境 的污染以及促进单 胃动物对饲料 中矿质营养的吸收利用有重要作 用，因此植酸酶的研究有重要的科学和实用价值 。获得高活性高热稳定性 的植酸酶是近年来植 酸酶工业的研究热点和难点，综述 了植酸酶及其热稳定性研 究的现状和提 高植酸酶热稳定性方 法的最新进展。 关键词 植酸酶 热稳 定性 蛋 白质工程 饲料添加剂 植酸酶是一类能够水解植酸及植酸盐 的磷酸 前注册的植酸酶蛋 白序列 已有近 200种。虽然其 酶。它能将植酸水解成肌醇和无机磷酸 ，供有机体 中包括了许多人工改造过 的酶蛋白，但大部分都是 利用。 目前主要用作饲料添加剂 ，增加动物对矿物 从 自然界发现 的，除此之外还不断有新的天然酶被 质的利用，促进动物的生长发育，降低磷的排放量 。 发现。如近来在青霉菌乜】、酵母∞】、乳酸菌 】、芽孢 目前 ，植酸酶 已经实现 了工业化生产 ，但 是在 杆菌 】、大肠杆菌n】、豆类植物 等生物体 中又发 植酸酶的推广应用 中还存在一些问题 ，其 中较为突 现 了很多有前景的天然植酸酶。尤其是芽孢杆菌 出的是植酸酶的热稳 定性问题 。饲料生产 中的制 植酸酶具有近乎中性的最适 pH值，酶活性高，热 粒过程需要经过高温加热，一般在 75℃～80℃，同 稳定性好 ，可广泛应用于鱼类饲料 。大肠杆菌 时为 了杀死沙门氏菌 ，有时温度高达 85℃ ～90℃， 植酸酶 良好的热稳定性和蛋 白酶抗性也深受人们 植酸酶在这样的温度下很容易失活 ，通常活性降为 关注 。 原来的30％，甚至更低。所 以，进一步筛选耐热性 由于产植酸酶的天然株大都表达量低 ，在筛选 更好 的植酸酶以及探索更好 的提高植酸酶的热稳 优质高产酶的过程中人们对 多种植酸酶基因进行 定性 的方法仍是研究的重点。 了重组表达。如首次在真菌 中分离 出的 6一植酸酶 植酸酶广泛存在于植物 、动物及微生物 中。 目 (EC3．1．3．26)基因在 Aspergillusoryzae中得到重组 前对植酸酶的研究集 中在产酶菌种 的筛选 、酶基因 表达 】。姚斌等将 Bacillussubtilis的中性植酸酶基 的克隆表达和酶蛋 白的人工改造及与这些 内容相 因印 在 E．coli中高效表达 ，获得 了有正常的生 关的性质研究和利用方面。 物学活性 的重组酶 。AspergiUus[umigatus 的植酸 酶基因在 A．nigerNW205中表达后 ，获得 的重组酶 1 天然植酸酶的筛选和重组表达 在 100℃下加热 20rain后 ，酶活仅损失 10％，有很好 从 1907年发现第一个植酸酶至今 ，人们已经 的热稳定性 IJ。 目前应用最广的植酸酶基 因是来 从酵母菌 、曲霉 、青霉、隔孢伏革菌 、假单孢菌 、枯草 源于无花果 曲霉 A．ficuum—NRRI_3135的 phyA基 杆菌、乳酸杆菌、大肠杆菌等菌种 ，以及玉米 、番茄、 因，它 已在多个表达系统 中表达植酸酶 phyA。重 麦麸等植物性产物 中分离得到多种植酸酶或有植 组表达技术与分离筛选技术相结合促进