不同频率电针对脑缺血再灌注大鼠齿状回SCF表达的影响.pdfVIP

Vd．16No．5 ·339· 中国中医药科技2009年9月第16卷第5期sep．2009 ·针灸经络研究· 不同频率电针对脑缺血再灌注大鼠 齿状回SCF表达的影响* 熊克仁赵祥沈律 (皖南医学院·芜湖241002) 摘要 目的：观察不同频率电针对老年大鼠不完全性脑缺血再灌注损伤后神经细胞干细胞因子(scF) 表达的影响。方法：以双倒颈总动脉夹闲法建立大鼠前脑不完全缺血再灌注模型，随机分为正常组、假手 术组、缺血模型组，2Hz电针组和128Hz电针组，应用免疫组织化学技术检测各时段大鼠齿状回的ScF基 因蛋白表达。结果：缺血再灌注后scF表达增强，缺血再灌注7天时，齿状回SCF阳性神经元数显著增多 (尸0．01)，至14天时，scF阳性神经元数仍高于正常对照组(P0．05)，以后渐恢复至正常水平。缺血 再灌注后低频或高频电针均可使齿状回SCF阳性神经元数量增加(P0．晒)，两者间无明显差异。结论： 电针能促进s口的表达，可能与脑卒中患者的康复有关。 主题词 再灌注损伤／针灸疗法脑齿状回／针灸效应 电针 大鼠 脑卒中是严重危害人类健康的常见病、多发病，具有发 处死大鼠。 病率高、死亡率高、致残率高等特点，常见于中老年人，是致 1．3标本采集及处理各组动物戊巴比妥钠经腹腔麻醉 残和社会劳动能力降低的重要原因。针灸对脑卒中有良好 后，用生理盐水150ml经心灌流冲洗，再用350ml含4％多聚 的治疗作用【I．3】。影响针灸疗效的因素较多，针灸治疗的时 间窗、频率是其中重要的两个参数HJ。干细胞因子(st锄ceu注固定1小时，取出脑组织，常规梯度乙醇脱水，二甲苯透 factor．scF)是近年来发现的一种多功能细胞因子，广泛分布明，浸蜡，包埋，切片，厚度5邮，粘于经多聚赖氨酸处理后的 于中枢神经系统，能刺激整体动物神经再生。抽等b1报道， 玻片上，置入56℃烤箱30～60分钟，切片常规脱蜡至水。 脑缺血后，碱性成纤维细胞因子一2和SCF的合成增加，同1．4指标测定采用免疫组织化学ABC法显示scF阳性神 时脑室壁脑室下区和齿状回scF的受体c—l【it上调，sCF可 经元。①切片人30％的H2q1份+蒸馏水lO份的混合溶液 能在脑缺血损伤的修复过程中起作用。本研究应用免疫组 中，室温下10分钟，蒸馏水洗3次；②热修复抗原：切片浸入 织化学技术，观察不完全性脑缺血再灌注后，不同时期、不同 O．01珊出L枸橼酸盐缓冲液(pH值6．0)中，电炉加热至沸腾 频率的电针对大鼠齿状回SCF表达的影响，旨在为电针治疗 后断电，间隔10分钟后重复1次，冷却后0．02r枷L磷酸缓 缺血性脑病提供依据。 1材料与方法 正常山羊血清(BSA)封闭液，室温20分钟，甩去多余液体，不 1．1实验动物与分组老年(18月龄)健康雄性sD大鼠88 洗；④滴加兔抗鼠scF一抗(1：00，由博士德生物工程有限公 只，体重420。5209，由南京市青龙山动物繁殖场提供。随机 司提供)。37℃1小时，0．02fml，L PBS(pH值7．2—7．4)洗涤2 将大鼠分为正常对照组、假手术组、缺血再灌注7、14、21天分钟×3次；⑤滴加生物素化山羊抗兔IgG，37℃，20分钟， 组，缺血再灌注2Hz电针组(30分钟，7、14天)，缺血再灌注 0．02n洲L 3次。⑥滴加 PBS(pH值7．2—7．4)洗涤2分钟x 128Hz电针组(30分钟，7、14天)，共11组，每组8只。