中成药中的芽孢杆菌鉴定.pdfVIP

中国药品标准2001年第2卷第4期 ●药典专题● 中成药中的芽孢杆菌鉴定 赵国辉 周盛琦 戴新羽 梅 伟 刘 德 (哈尔滨市药品检验所 哈尔滨150076) 摘要 目的：随机取抽验细菌数超限的中成药20批，对培养检出的芽抱杆菌进行鉴定。方法： 根据培养检出的16株芽孢杆菌的形态、生理生化、碳源及氮源利用等32项特征鉴定到种。结果与 讨论：16株芽抱杆菌中，巨大芽抱杆菌3株；枯草芽孢杆菌8株；环状芽孢杆菌3株；蜂房芽孢杆菌 1株；球形芽抱杆菌l株。从中成药检出以上芽孢杆菌，说明中成药现行幅射剂量可能不足，或是保 存期间再次受微生物污染，具体原因待进一步探讨。建议今后的《中国药典》，在(微生物限度]检查 项目中，应当考虑增加有关芽孢杆菌的质控内容。 关键词 中成药；芽孢杆菌；鉴定 《中国药典2000版规定[微生物限度检查法](三)鉴定方法 系指非规定灭菌制剂及其原辅料受到微生物污染程 将保存菌株接种普通营养琼脂及血琼脂平板， 度的一种检查方法，包括染菌量及控制菌的检查。在 按药典规定对口服中成药品[微生物限度]染菌量的 态、革兰氏染色性及抗酸性、芽孢、运动性、空气中生 检验中，我们对确认经过C060幅射方法处理过的中长、厌氧生长、接触酶、氧化酶、葡萄糖产酸及O—F 成药进行检验时，仍有污染细菌数超限的情况，而且 试验。根据11项特征确定是否为芽孢杆菌属细 当细菌数超限时，往往检出大量的芽孢杆菌。为了从 菌邙3。然后按表1所列各项进行种别鉴定。用枯草芽 C 卫生学的角度对中成药品的质量进行探讨，随机从 孢杆菌及球形芽孢杆菌做试验对照。记录307天 1999年抽验[微生物限度]不合格的47批(不合格的各项试验结果。 率为13％)中抽取20批中成药，将其中检出的芽孢 二、结果 杆菌进行鉴定。 (一)菌株的共同特征 一、材料和方法 15株菌均为革兰氏阳性，中等大、直或近似直 (一)菌株 的杆菌(1株菌例外为革兰氏阴性)，只形成一个芽 将中成药按《中国药典》规定方法，用营养琼脂 孢，不抗酸。用悬滴法检查有固有运动。14株菌在空 平板30℃培养48h，挑取灰白色，浅灰色毛玻璃状、气中生长良好，另2株在厌氧条件也可生长，接触酶 带起伏边绷或扩展生长的菌落做革兰氏染色，观察 阳性，氧化酶阴性。15株菌能氧化分解葡萄糖产酸， 染色性及芽孢。然后穿刺接种软琼脂高层，30℃经 1株菌呈阴性。这些特征符合芽孢杆菌属的基本特 征。 18～24h生长后封灭菌液体石蜡，置4℃保存。共16 株。试验对照菌株为枯草芽孢杆菌(CGMCC1．88)、 ()菌种鉴定 球形芽孢杆菌(CGMCC1．929)，来自中国科学院微 根据各菌株的32项试验结果，其中巨大芽孢杆 生物研究所。 菌3株，枯草芽孢杆菌8株，环状芽孢杆菌3株。蜂 (--)培养基 房芽孢杆菌1株，球形芽孢杆菌1株(见表1)。 芽孢杆菌属鉴定用好氧、厌氧生长试验使用一 三、讨论 管多用培养基n3，O—F试验使用GF培养基，芽孢形 成试验使用土壤浸液琼脂培养基乜。33。表1所列的染 (一)属的共同特征 液、试剂及有关生理生化试验用培养基参照文献“巧3