液相色谱法检测饲料中的己烯雌酚.pdfVIP

饲鞘广 2011年第12期 31 检测分析 Decrmmi…zd,4， i． 液相色谱法梅测饲料巾硇己烯雌酚 贾 涛 摘 要 ：利用高效液相色谱法 (HPLC)检测饲料 中己 4．2HLB固相萃取净化小柱(规格：60mg，3mL)； 烯雌酚的含量 ．试样 中的己烯雌酚经 20％甲醇溶液提取 ， 4-3流动相 ：60％甲醇溶液 (量取甲醇 600mL，定 过HLB固相萃取净化柱小柱净化．再于高效液相色谱仪 容至 1000mL容量瓶 中)，加入磷酸调 0．5mL，氦 测定．以己烯雌酚标准工作溶液的浓度为横坐标 ，峰面积 气脱气或超声脱气： 值为纵坐标绘制标准 曲线 。此方法具有操作简单、灵敏度 4．4 样品提取液 ：20％甲醇 (量取 甲醇200mL，定 高、时间短 、准确性好等优点 ，检测回收率 为 8t．4％～ 容到 1O00mL容量瓶 中)： 94．8％．回收率标准偏差 (RSD)≤1．48％，标准 曲线相关系 数 (r值)I0．999946，变异系数(CV值)≤0．98％。 4．5 己烯雌酚标准品，纯度I99．0％(国家标准物 关键词 ：液相色谱 ；HLB；饲料 ；己烯雌酚 质 中心提供)： 4．6 己烯雌酚标准溶液： 1 己烯雌酚简介 4．6．1己烯雌酚标准贮备液：准确称取己烯雌酚 小量可刺激垂体前叶促性腺激素 。大剂量抑 标准 品 (4．5)0．1000g，用 甲醇 (4．1)定容至 lOOmL 制垂体前叶促性腺激素和催乳素的分泌，有抵消 棕色容量瓶 中，摇匀，此溶液浓度为 1．0mg／mL，保 雄激素的主要作用 ．并抑制催产素酶而增强催产 存于O℃冰箱 中．有效期 3个月。 素的作用 。 4．6．2 己烯雌酚标准中间液：准确量取己烯雌酚 标准贮备液 (4．6．1)1．0mL。用 甲醇 (4．1)定容至 2 对己烯雌酚监测的意义 lOOmL棕色容量瓶 中．此溶液浓度为 10．0ug／mL． 己烯雌酚添加到饲料里主要起到使被饲喂 保存于4℃冰箱 中，有效期 1个月。 动物提高产崽率或催情作用 ．人食用含有己烯雌 4．6．3 己烯雌酚标准工作溶液 ：准确移取 己烯雌 酚的动物内脏或肌肉后会造成体 内激素失调．从 酚标准 中间液 (4．6．2)1．0mL用 甲醇 (4．1)定容至 而带来对人体建康的危害．根据饲料管理条例 中 100mL容量瓶 中：准确移取 己烯雌酚标准中间液 规定禁止在饲料中使用与添加 (4．6．2)0．5、1．0、2．0、5．0、10．0mL，分别用 甲醇 (4．1) 定容至 lOmL容量瓶 中：此标准工作溶液分别对 3 检测原理 应 的浓度为 0．1、0．5、1．0、2．0、5．0、10．Oug／mL；当13 试样 中的己烯雌酚经 甲醇溶液提取 ，过 HLB 配制使用。 固相萃取净化柱小柱净化．再于高效液相色谱仪 测定 ．以己烯雌酚标准工作溶液 的浓度为横坐