地尔硫卓抑制药物肝脏代谢的机理的研究.pdfVIP

地尔硫革鳓9药物肝脏代谢的机理研究 印绮平王宏图张静华奚念朱2 (上海医科大学华山医院临床药学研究室上海200040； l上海医科大学药学院生物药剂研究室上海200032) 临床用药过程中发现，当Dz与某些药物(如茶碱、利多卡因、硝苯地平、环孢霉紊)联台应用 时，可降低后者的清除率，使血药浓度升高．作者研究发现[1。]，DZ对美托洛尔和普鲁帕酮在 家兔及人体内的代谢具明显抑制作用，提示DZ是一潜在的肝药酶抑制荆。目前，DZ对合用药 物在肝脏代谢的抑制性及不良相互作用已引起临床关注·但其发生机理尚未明确。鉴于DZ在 临床应用的广泛性以及与较多药物合用的可能性，有必要进行此机理研究。 作者进一步研究发现，Dz的抑制作用具有选择性，它可能通过选择性地抑制细胞色素 制作用。本文就这一机理的存在与否进行深入探讨和论证。 1药品与试剂 DZ(上海延安制药厂)；N一去甲基DZ(法国Synthelabo (美国Sigma公司)。 2实验方法 2．1 MI复合物在体外的形成试验 禁食12h，最后一次给药后24h处死。 2．1．2肝微粒体制备：大鼠肝组织在4℃下用pH7．4 0．1M磷酸缓冲液中，一70(2冰箱贮存。蛋白含量按Lowry法03测定。 2．1．3 5 0．02M Dz亦溶液10pl，参照杯加人10pl蒸馏水，讳杯中均加入0．2MNADPH磷酸缓冲液 490nm处的吸收度，计算结合型P450台量。 同一肝微粒体按以上两步操作，测得结合型P450含量和结合前总的游离型P450含援， 两者之比即为MI复合物的形成百分率， 2．{’MI复合物在体内的形成试验 米松玉米油混悬液(100mg／kg，ig×3d)诱导．处死前36hip单剂量DZ水溶液100mg／kg．于 地塞米松最后一次ig后24h，将太鼠处死。B组以生理盐水代替地塞米松，同A处理。C组给 肝微粒体。 2．0．2MI复合物的检测：大鼠肝微粒体用pH7．4确酸缓冲液稀释成蛋白含量2mg／ml，各取 AA(455—490)计算结合型P450含量。 取相同样本·按前述Omura法，测定游离型P450含量，并计算MI复合物的形成百分率。 2．3 DZ、N一去甲基DZ与P450结合光谱的测定 取经地塞米松诱导后的大鼠肝微粒混悬液．稀释成蛋白含量为2mg／ml，各取2ml至参照 杯和样品杯中·350nm～500nm之间扫描基线。然后样品杯中加入4MmDZ水溶液或N一去 K，、A～。 3买验结果 3．1 MI复合物在体外的形成 A、B、C、D 4组大鼠经不同诱导后，肝微粒体中P450含量见表l。DZ在不同处理组大鼠 见图1。温孵25min后MI复合物总生成百分率见图2。 liable1 P450 ratlivermicrosomesog withvarious content(nmol／mg)in u|ltreatedpretreated inducera treatment1 2 3 4 5 Mcan士SD SMIne 1．02 o．82 o70 1 01 0．80 0，87士0．14 DEX 2．29 1．87 1 76 2 34 1．78 2．01士0，28 PB 1．46 1．38 1．4j 1 33 1．70 1．46：i=0．14 BNF 1．23 1．28 1．54 1．35 1．59 1．40i：0．16 6 40 g 三 i30 三 黑20 考 110 兰 ‘0 0 10 20 30