利用PCR-RFLP技术鉴别异尖线虫.pdf

福建农林大学学报(自然科学版) 第39卷第4期 Journalof and Science 2010年7月 FujianAgricultureForestryUniversity(NaturalEdition) 利用PCR-RFLP技术鉴别异尖线虫 郑洋妹1，龚艳清2，陈信忠2 摘要：应用PCR．RFLP技术对福建沿海海鱼中常见的简单异尖线虫、典型异尖线虫、对盲囊线虫和针蛔线虫幼虫进行鉴定． 据序列分析结果，选用限制性内切酶炳∥I和RsaI进行酶切，酶切产物经琼脂糖电泳分析．结果表明：同时使用胁矿I和 Rsa I酶，可以将4种异尖线虫进行分类；应用特异性引物扩增这4种异尖线虫，获得了预期扩增片段．可见，根据4种线虫 ITS序列建立的PCR·RFLP技术能够对这4种异尖线虫进行准确、特异和快速的鉴定． 关键词：PCR—RFLP；简单异尖线虫；典型异尖线虫；对盲囊线虫；针蛔线虫 中图分类号：S852．73+1文献标识码：A 文章编号：1671．5470(20lO)04-0374-05 nematodesPCR-RFLP GeneticidentificationofAnisakidae by ZHENG Yang—meil，GONGYan．qin92，CHENXin—zhon92 ofAnimal and (1．Colege Science，FujianAgricultureForestryUniversity，Fuzhou，Fujian350002，China； 2．Xiamen and Entry—Exit Bureau，Xiamen，Fujian361012，China) InspectionQuarantine were foundin coastal Abstract：Anisakissimplex，A．typica，ContracaccumRaphidascaristrichiuri，whichcommonlyFujian sp．and marine identified chainreactionlinkedrestriction a fish，were length bypolymerase fragment ofconserved ofthe transcribed Anisakidaenematodeswere PCR． internal pair primers，thesequences spacer(ITS)of amplifiedby The were Rsaselected tothe ofITS8e· and I amphcompurified，reclaimed，cloned，anddigestedby胁矿I accordinganalysis beclassifie