残留溶剂的测定方法.pptVIP

残留溶剂的测定方法 台州市药品检验所 李俊 一、气相色谱的基本知识 二、残留溶剂的测定方法 三、残留溶剂测定方法的建立和方法学验证 一、气相色谱的基本知识 主要提一下与残留溶剂检测相关的气相色谱知识。 1.色谱柱 按照相似相溶的原理选择色谱柱。毛细管柱有极性柱、非极性柱、弱极性柱和中等极性柱。填充柱有高分子多孔小球或涂渍适宜固定液的填充柱。 2.进样方式 （1）顶空进样 顶空进样又分为溶液顶空和固体顶空。一般采用溶液顶空，就是将样品溶解于适当溶剂中,置顶空瓶中保温一定时间,使残留溶剂在两相中达到气液平衡,定量取气体进样测定。 优点：在较低温度下进行，避免组分分解；减少溶解样品的溶剂量和样品本身对色谱系统的干扰和污染，缩短分析时间，增加色谱柱的寿命。 缺点：需要特定的顶空进样装置，成本较高，对沸点较高的溶剂检测灵敏度不够，一般多应用于沸点100℃以下的溶剂 现一般采用自动顶空进样器 （2）直接进样 指将样品定量溶解于适当溶剂中,准确量取适量注入气相色谱仪测定溶剂残留量的进样方法。进样体积一般为2μL 以下。本法为通常采用的方法,适用于受热不易分解的样品 优点：简便、无需专用设备，绝对进样量大 缺点：污染进样口及柱子，溶剂峰响应大，样品分解产物或溶剂杂质峰可能影响测定，对溶剂的纯度要求高 3.检测器 在药物溶剂残留检查中，一般选用氢焰离子化检测器（Hydrogen Flame Ionization Detector，FID），该检测器对烃类、芳烃类化合物有普遍响应，适合于分析多种溶剂残留，灵敏度高，是最常用的气相检测器之一。但该检测器对卤代烃类溶剂响应较差，检测灵敏度不高，在检测四氯化碳、二氯乙烷、氯仿等浓度限量较低的溶剂时可能会达不到仪器的检测器，因而在这些溶剂的检测时一般不建议使用该检测器。? ? 电子捕获检测器（Electron Capture Detector， ECD） 是电负性有机化合物的专属检测器，对含X、S、O、NO2、CN等溶剂有较高的检测灵敏度，微量ECD检测器的检出水平可达fg级，较适合分析卤代烃等溶剂。多数情况下建议采用该检测器检测四氯化碳、二氯乙烷、氯仿等溶剂。 4.定性与定量 （1）定性 根据保留时间定性 （2）定量 峰面积 外标法 内标法 标准加入法 利用加入该组分前后色谱峰响应信号的变化而计算被测组分含量的方法 测定供试品 测定对照品＋供试品 二、残留溶剂的测定方法 （一）.残留溶剂的定义 定义:药物中的残留溶剂（ Residual Solvent ）系指在原料药或辅料的生产中，以及在制剂制备过程中使用的，但在工艺过程中未能完全去除的有机溶剂。 研究的性质：杂质研究的范畴 研究的目的:控制药物质量，保障病人用药安全。 在原料药合成中，溶剂的选择是合成中非常关键的因素,选择适当的溶剂可提高得率或决定药物的性质，如晶型、纯度和溶解度，从而影响疗效。同时，在某些特定的制剂生产中，其工艺也要求使用特定的溶剂。 但由于溶剂没有疗效，故所有残留溶剂均应尽可能除去，以使产品符合其规范、GMP或其他基本的质量要求 。 （二）.如何根据已有的方法进行残留溶剂的检测？ 1.根据质量标准确定实验方案 主要是实验条件的选择（选择测定方法，选择色谱柱、检测器、进样器等，选择合适的检测方法） 顶空分析法：一般来说，每个顶空瓶中的样品只能进样一次 直接进样法：配制一份溶液可以重复进样几次 判断顶空条件是否适用，一般的规律是： 顶空瓶的平衡温度应低于溶解样品所用溶剂的沸点10℃以下，能满足检测灵敏度即可； 对于沸点过高的溶剂，如DMF、DMSO、聚乙二醇等，用顶空进样测定的灵敏度不如直接进样，不适宜采用顶空法 2.溶液的配制 空白溶液、对照品溶液和供试品溶液 （1）溶解性 要重视溶解性的问题。 供试品要能完全溶解（特殊情况下，常温下不能溶解的能加热溶解的也行）；对照品也要能完全溶解，对于被测残留溶剂不能溶解于选定的溶剂时应怎么办？（如氯仿不溶于水的情况） （2）配制浓度的确定 限度检查：对照品溶液浓度一般配制成要求的限度浓度即可。 定量测定：对照品溶液的浓度应根据被测样品中残留溶剂的实际浓度而定。浓度相差最好不超过两倍为宜。必要时，应重新调整 。 药典上规定供试品取样量为0.1～1g，最好不超过0.5g，取样量越大，灵敏度越高，但回收率越不容易符合要求。 顶空瓶：10ml和20ml。 3.色谱条件的确定 给定的色谱条件不一定适合当前的仪器条件。可以对标准给定的方法进行适当的调整（如流速、柱温等），因为方法应该都有耐用性。 要注意顶空条件。 采用高沸点的化合物（如DMF或