各种恩替卡韦耐药HBV株鉴定及替诺福韦酯对其抑制力分析.pdf

· · 传染病信息 2013 年 04 月 30 日 第26 卷 第 2 期 Infect Dis Info, Vol. 26, No. 2, April 30, 2013 96 各种恩替卡韦耐药 HBV 株鉴定及替诺福韦酯对其抑制力分析 李艳乐，刘 妍，许智慧，王 晓，陈 丽，戴久增，姚增涛，江 玲，张连峰，徐东平 [摘要] 目的 分析临床分离 的不同形式恩替卡韦（ ）耐药 株的病毒复制力并探讨替诺福韦酯 （ ）对其的抑 ETV HBV TDF 制力 。 方法 从 例 治疗失败 的慢性乙型肝炎患者血清 中提取并扩增 反转录酶 （ ）基因，克 4 ETV HBV reverse transcriptase, RT 隆测序分析其基因型耐药变异特点。 选取代表性野生型和 耐药型 克隆株，构建 （） 倍重组表达载 ETV HBV pTriEx-HBV C 1.1 体 。提纯质粒转染 HepG2 细胞系，5 d 后检测上清 中 HBV DNA 产生量，分析不同变异形式 ETV 耐药变异株体外复制力水平及 TDF 对其抑制力 。 结果 4 份血清 中共得到 16 种含不同 HBV RT 区变异形式的克隆株， 10 种与 ETV 耐药有关 ，另有 6 种与 拉米夫定耐药有关 。 表型分析显示：与野生株相比 ， 耐药变异株复制力水平均有所下降 ，其中 变异株复制 ETV rtT184I＋M204I 力最低 ，是野生株的 ， 基础上出现补偿突变（ 、 和 ）的变异株复制力较高，存在相 同 19.3% rtM204I＋M250L rtL80I rtV173L rtL180M 补偿突变的前提下 ， 基础上的耐药变异较 基础上的复制力低 。 对各种类型 耐药变异病毒的复制力 rtM204I rtM204V TDF ETV 均有较强抑制作用（ ）。 结论 与野生株相比 ，不同变异形式的 耐药变异株体外复制力均下降 ， 可有 96.11%～99.90% ETV TDF 效抑制 ETV 耐药变异株复制，将是治疗 ETV 耐药患者的一种很好 的选择 。 [关键词] 乙型肝炎病毒；突变；抗病毒药；抗药性 [中国图