家蚕肌钙蛋白CⅢ基因的原核表达及其抗体的制备.pdf

农业生物技术学报，2010年，第18卷，第6期，第115“1162页 Journal 156ol162 ofAgriculturalBiotechnology,2010,V01．18,No．6,1 研究报告 A Letter 家蚕肌钙蛋白CⅢ基因的原核表达及其抗体的制备 严巧灵1,2陈剑清t’2王丹·2叶曼1’2吴祥甫1筇张耀洲1≯ 物学研究所，上海200031 。通讯作者．yaozhou@chinagene．tom mori 钙蛋白Cnl亚型的cDNA序列，将其命名为BmTnCIII(Bombyx I和Hindm酶切位点的 可编码153个氨基酸残基组成的TnCm蛋白。根据该cDNA序列，设计带有BamH mmol／L IPTG诱导表达重组蛋白后，在 pET．28a—Bm‰CⅢ转化大肠杆菌(Escherichiacoli)Rosetta(DE3)，经l 分子量约21 疫雄性新西兰白兔(Oryctolagus 隆抗体具有较高的特异性，可用于后续的组织分布与定位研究。 关键词家蚕，肌钙蛋白CHI(TnCm)，原核表达，多克隆抗体 and of CIH(TnCⅢ) ProkaryoticExpressionAntibodyPreparationTroponin from mori Bombyx Yan Chen Danl工YeManl2Wu Yaozhoul≯ Qiaolin912Jianqin91。Wang Xiangful23Zhang I CollegeofLifeSciences，ZhejiangSei-teehUniversity,Hangzhou Biomedicine，Hangzhou310018，China；3 200031，China ’Correspondingauthor,yaozhou@chinagene．com DOI：10．3969／j．issn．1674-7968．2010．06．019 Abstract C one ofTrlC．Inthisresearch．TnCmfusion was in TroponinIll(TnC111)issubtype proteinexpressed and was forfurtherresearch．AcDNA Escherichiacoli subtype sequence polyclonalantibodyprepared coding TnCmwasobtainedfromour cDNA BmTnC moriTnC mori)pupallibrary，namedm(Bombyx silkworm(Bombyx aminoacid 1．ThiscDNAcontainedafull coded153 residues． m length frame(ORE)ofBmTnCm ofopenreading