猪流行性腹泻病毒RT_PCR检测方法的建立.pdfVIP

中国畜牧兽医 年第 卷第 期 生物技术 · · ２０１２ ３９ ５ 　 ７９ 猪流行性腹泻病毒ＲＴＰＣＲ检测方法的建立 － 罗永珍 （ ， ） 青海省湟源县城关镇兽医站 青海湟源 ８１２１００ 　 ： （ ） （ ） ， 摘要 试验根据 ＧｅｎＢａｎｋ上发表的猪流行性腹泻病毒 ＰＥＤＶ 核衣壳 Ｎ 蛋白基因序列 设计合成了一对寡聚核苷酸引 ， ， 。 ， 物 扩增大小为 ２４５ｂ 的目的片段 建立起 ＰＥＤＶ Ｎ 基因的 ＲＴ ＰＣＲ检测方法 试验结果表明 该方法具有很强特异性和很 ｐ 　 － ， 。 高的敏感性 可作为猪流行性腹泻临床快速诊断的一种方法 ： ； ； 关键词 猪流行性病毒 ＲＴ ＰＣＲ 检测 － 中图分类号： 文献标识码： 文章编号： （ ） Ｓ８５８．２８ Ａ １６７１７２３６２０１２０５００７９０３ 　　　　　 　　　　　 － － － 猪流行性腹泻 （ ， 扩增目的片段大小为 。 引物序列为： ： ｏｒｃｉｎｅ ｅｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａ ２４５ｂ Ｐ１ ５′ 　 　 ｐ 　 ｐ 　 ｐ － ） （ ； ： ＰＥＤ 是由猪流行性病毒 ｏｒｃｉｎｅｅｉｄｅｍｉｃｄｉａｒｒｈｅａ ＴＴＴＴＴＣＧＣＴＴＴＣＡＧＣＡＴＣＣＴ ３′Ｐ２ ５′ＧＴＡＧ － － － ｐ 　 ｐ 　 ， ） 、 。 引物由上海生物 ｖｉｒｕｓＰＥＤＶ 引起的一种以呕吐 腹泻和脱水为特 ＣＡＡＣＣＴＴＡＴＡＧＣＣＣＴＣＴ ３′ － 征的猪肠道传染病。 ＰＥＤＶ 属于尼多病毒目 技术有限公司合成。 （ ） （ ） 病毒 制备 采用上海生工公司的 冠状病毒科 冠状病毒 １．４ ＲＮＡ Ｔｒｉｚｏｌ