地黄实时定量pcr内参基因de筛选.pdfVIP

中圈雅亏c童握 2011，27(17)：76—82 ChineseAgriculturalScienceBulletin 地黄实时定量PCR内参基因的筛选 侯雏海”，孙 鹏 ，陈全家 ，李先恩 (新疆农业大学农学院，马鲁木齐 830052； ：中圈医学科学院中圜协和医科大学药用植物研究所，北京 100r93) 摘 要：笔者通过RT-qPCR分析了地黄中7个传统内参基因18S、EF-Ia、ACTI1、UBQIO、UBQ5、TUB5、 6 肋 口4个新报道的内参基因PP2A、RP 、HsPgo、TIP41的mRNA表达差异情况，分别利用Ct值比 较 ，GeNorm、NormFiner和BestKeeper~z件分析它们在2个发育时期、8种不同组织器官中表达稳定性。 结果表明：在地黄花器官中(花瓣、花托、雄蕊、雌蕊、子房)，TIP41和UBQIO表达稳定；在地黄生殖生长 期和营养生长期不同器官中(根、茎、叶)，TIP41和UBQ5表达稳定。因此，以上2组基因分别适宜作为 不同营养器官的内参基因。 关键词：实时定量PCR；内参基因；GeNorm程序；地黄 中图分类号：S一3 文献标志码 ：A 论文编号：2010．3219 SelectionoftheReferenceGenesforGeneExpressionStudiesinRehmanniaglutinosa byReal-timeQuantitativePCR HouWeihai，SunPeng，ChenQuanjia，LiXian’en (CollegeofAgronomy,XinjiangAgriculturalUniversity，Urumqi830052； 2InstituteofMedicinalPlantDevelopment,ChineseAcademyofMedicinalSciencesand PekingUnionMedicalCollege，Beijing100193) Abstract：A totalof 11referencegenesweresystematicallycompared indifferenttissuesofRehmannia glutinosausingRT-qPCR，including 7 traditionalreference genes CT／1，18s,TUB5，GAPDI-I,EF-la, UBQlOandUBQS)and4novelcandidatesreferencegene(HsPgo，PP2A，即 andTIP41)inthisstudy．The mRNA levelsofthesegeneswereanalyzedamongtheorgansofflowers，roots，stemsandleavesrepresenting thevegetativegrowthphaseandthegenerativegrowthphase．Thestabilitiesofthe11candidatereferencegenes wererankedbytheCtvaluecomparisonandthreesoftwares(GeNorm，NormFinerandBestKeeper)．Theresults showedthattheexpressionofTIP41andUBQIOwasstableindifferenttissuesofsepals，petals，stamens， pistils，andovaryfromflower．Forthecaseoftheroots，stemsandleavessampledinvegetativegrowthphase andgenerativegrowthphase，U