缺氧微环境对人肺癌高转移细胞株95D失巢凋亡的研究.pdfVIP

中国医科大学学报 第44卷 第5期 2015年5月 ·456 · JournalofChinaMedicalUniversity Vol.44 No.5 May2015 ·论著 · 缺氧微环境对人肺癌高转移细胞株95D失巢凋亡的研究 王艳，陈新，高旭灵 （沈阳市第四人民医院肿瘤内科，沈阳 110031） 摘要 目的 研究缺氧微环境对人巨细胞肺癌高转移细胞系95D失巢凋亡的影响。方法 对95D悬浮培养，建立人肺癌高转 移细胞株95D失巢凋亡抵抗细胞模型，实验组进行缺氧培养，对照组正常有氧培养，MTT检测缺氧微环境对于失巢凋亡抵抗 95D细胞系生长的影响，流式细胞仪检测2组细胞的凋亡情况，Transwell实验检测2组细胞侵袭能力，Westernblot检测缺氧对 于失巢凋亡抵抗95D细胞中HIF⁃1α、VEGF和MMP⁃2蛋白表达的影响。结果 缺氧微环境下失巢凋亡抵抗细胞组生长率为 52.9%；凋亡率（40.4%）明显高于非缺氧培养组（21.7%），差异有统计学意义（P0.05）；侵袭能力降低，穿过膜细胞数（40.1±6.7） 明显低于对照组（12.5±7.9），差异有统计学意义（P0.05）；缺氧微环境下失巢凋亡抵抗95D细胞中HIF⁃1α表达上调，侵袭转移 相关蛋白VEGF和MMP⁃2表达下调。结论 在人肺癌高转移细胞株95D失巢凋亡过程中，缺氧微环境能从一定程度上抑制失 巢凋亡抵抗细胞的生长，缺氧微环境能降低失巢凋亡抵抗细胞的生存能力和转移能力，但这可能是缺氧后早期表现。 关键词 肺癌；95D；缺氧；失巢凋亡 中图分类号 R734.2 文献标志码 A 文章编号 0258-4646（2015）05-0456-05 网络出版地址 The Effect of Hypoxia on Anoikis in High⁃metastatic Human Lung Cancer Cell Line 95D WANGYan，CHENXin，GAOXu⁃ling （DepartmentofOncology，TheFourthHospitalofShenyang，Shenyang110031，China） Abstract Objective Toinvestigatetheeffectofhypoxiamicro⁃environmentonanoikisinhumanhigh⁃metastaticcellline95Dofgiantcellcarci⁃ nomaoflung.Methods Suspensiontechnologywasusedtoculture95Dtoestablishthemodelofanoikis⁃resistant95Dcells.Hypoxicculturewas conductedintheexperimentalgroup，andregularculturewasconductedinthecontrolgroup.Theeffectofhypoxiaonproliferationofanoikis⁃resis⁃ tant95DwasinvestigatedbyMTTandtheapoptosisinthetwogroupsweredetectedbyflowcytometer.Theinvasiveabilityofthecellswasassessed byTranswelltest.TheeffectofhypoxiaontheexpressionofHIF⁃1α，VEGFandMMP⁃2inanoikis⁃resistant95DwasdetectedbyWesternblot.Re⁃ sults Thegrowthrateoftheanoikis⁃resistant95Dcellstreatedwithhypoxiawas52.9%，andtheapoptosisrateofthesecellswashigherthanthatin thenon⁃hypoxicgroup（40.4%vs21.7%，P0.05）.Thetreatmentofhypoxiadown⁃regulatedtheinvasiveability，thenumberofmigrationcellsun⁃ derhypoxiawashigherthantha