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一株植物乳酸杆菌LABR．X产细菌素的研究 摘要 抑制与之相同或相似生境的其他微生物。虽然许多细菌都能产生细菌素，但乳 酸菌产生的细菌素更适合在食品工业中应用。现在只有几种商品化的细菌素， 如nisin，nisin作为食品添加剂可以非常有效的抑制许多食品中的腐败菌，并延 长其货价期。但由于其不能抑制革兰氏阴性菌和抑菌活性的不稳定限制了它在 食品工业与饲料工业中的发展，所以我们要继续大力开发其他乳酸茵细菌素。 本文从自然的酸菜发酵液中挑选分离出形态良好的8株菌落菌株进行初 筛，通过抑菌实验，选取抑菌最大的菌株作为诱变出发菌株LABR，经微生物 外线与硫酸二乙酯对LABR多轮复合诱变筛选出抑菌活性最强的菌株 LABR．X，在排除有机酸和过氧化氢的干扰后，离心浓缩后的发酵液对指示菌 有强烈的抑制作用。 优化菌株LABR．X的培养条件，通过正交实验确定了最佳培养条件：培 液经蛋白酶稳定性实验发现，发酵液中的抑菌物质对胰蛋白酶和蛋白酶K敏 感，同时结合水合茚三酮反应和双缩脲反应得到的阳性结果，充分证明 LABR。X的发酵液中的抑菌物质含有多肽类物质成分，即乳杆菌素。 按照蛋白质物质提取纯化原理，LABR．X发酵产物经硫酸铵盐析法粗提、 制乳杆菌素，通过透析袋处理得到的抑菌活性最大的乳杆菌素组分分子量约 氨基酸和5种未知寡肽。 利用光学显微镜与扫描电镜菌体形态观察、碱性磷酸酶活性测定和p．半乳 糖苷酶活性测定等方法，对乳杆菌素抑菌机理进行了初步研究与探讨，实验结 果显示乳杆菌素能够破坏指示菌的细胞壁和细胞膜，从而达到抑菌的作用。 关键词：细菌素 诱变筛选 培养条件 纯化 抑菌机理 ofBacteriocinsProducedLABR-·Xof Study by Lactobacillus plantarum Abstract Bacteriocins certainbacteriaareantimicrobialor producedby peptides sufficient cankillorinhibitbacteria amounts，these proteins，in peptides competing forthesame nicheorthesamenutrient bacteriocinsare ecological p001．Although and Gram-negativespecies，thoseproducedby producedbymanyGram—positive areof interesttothefood theLAB particular industry．Todate，theonly bacteriocinsisnisin．Whilenisinhasbeenfoundtobe commerciallyproduced effectiveasanadditiveto andincreaseshelf-lifeina extremely preventspoilage offoods．Butitseffectivenesshasbeenmorevariablewith toother number