缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌Na-%27%2b-，K-%27%2b--ATP酶α亚基表达影响.pdf

中文摘要 缬沙坦对自发性高血压大鼠心肌Na+，K+．ATP酶Q 亚基表达的影响 摘 要 高血压病是全世界流行最广的心血管疾病，它不仅使 心、脑、肾等重要脏器受损，而且是动脉粥样硬化的首要 危险因素，因而成为心血管疾病防治工作中的重点【11。至 今，原发性高血压(Essential 尚未完全阐明，目前认为是在一定的遗传基础上由于多种 后天因素的作用使正常血压调节机制失代偿所致。分子生 物学的研究提出了高血压发病机制的“膜学说”，即高血 压的形成可能与细胞离子转运异常有关，而且已有研究表 明高血压患者血管结构、钙离子和钠离子转运等都会发生 改变【2】o Na+，K+．ATP酶是一种普遍存在于各种细胞的特殊膜蛋 白。主要由一个催化亚基Q亚基和一个糖基化的13亚基组 成。0【亚基又可以分为仅l、0【2、0【3、0L4亚型，其表达具有种 属特异性和组织特异性。0【l是最广泛表达的基因，眈主要 存在于骨骼肌、心肌、脑组织、脂肪组织、血管平滑肌和 眼。0【，存在于神经元细胞和卵巢，以及白细胞和人的心 肌。0【4存在于精子中，是精子移动所必须的【3】。Q1亚基对畦 巴因的亲和力低，而伐2、仅3亚基对畦巴因的亲和力高。 3个Na+转移到细胞外，并将2个K+转移到细胞内，从而 使细胞内外的钠、钾离子维持一定的电化学梯度。这一离 中文摘要 子梯度是机体基本功能活动的基础，比如，维持细胞膜静 息电位，维持细胞内外渗透压平衡及细胞容量，为营养物 质的转运提供能量等【4】，同时也间接调控着细胞内的Ca2+ 浓度，在血管张力和血压的调节中发挥着重要作用【5】。如 出细胞外，就会导致血管壁平滑肌细胞内Na+潴留，经过 兴奋性增高，最终促使血管收缩，外周阻力增加，血压升 高。因此，Na+，K+．ATP酶的功能异常成为导致血压升高的 关键环节。 目前已有研究表明，在高血压患者及1K1C高血压大 鼠、DOCA盐性高血压大鼠、SHR等多种实验性高血压动 的研究也表明1K1C高血压大鼠和SHR高血压的发展可导 致心肌细胞Na+，K+．ATP酶活性改变。然而，目前对于各种 mRNA水平变化情况的报道并不一致。 血管紧张素II是肾素．血管紧张素．醛固酮系统(RAAS) 的激活剂，是由血管紧张素I在血管紧张素转化酶(ACE)作 用下形成的，可与各种组织细胞膜上的特异受体结合。它是 一种强力缩血管物质，具有直接的升压效应，同时还可促 进钠的重吸收，刺激醛固酮分泌。缬沙坦是血管紧张素II 受体I(ATlR)的拮抗剂，可阻滞所有途径产生的血管紧张 素II与ATlR结合，使血管平滑肌松弛，降低动脉压，改善 左心室后负荷，逆转心肌肥厚【6J。本实验旨在研究自发性 高血压大鼠用缬沙坦降压前后心肌Na+，K+-ATP酶仅亚基的 中文摘要 酶在高血压发病机制中的作用。 目的： 比较自发性高血压大鼠(SHR)和血压正常的 表达水平。探讨血管紧张素II受体(AT】R)拮抗剂缬沙坦降 影响。 方法：将1 组、缬沙坦低剂量(1 0mg／Kg)治疗组、缬沙坦高剂量 水10ml／Kg灌胃一次，缬沙坦治疗组大鼠则于每日上午灌 胃给予相应剂量的缬沙坦蒸馏水溶液，持续灌胃4周，并 每周采用尾动脉测压法测定一次大鼠收缩压。 采用Western Blot方法测定Na+，K+．ATPase0【1及0【2亚 织膜蛋白，用BCA蛋白定量法进行蛋白质定量，10％ SDS，聚丙烯酰胺凝胶电泳，转膜，用5％脱脂奶粉25℃振 荡封闭1小时，加0t亚基特异性抗体，4℃孵育过夜， 三次，DAB显色。 采用半定量RT．PCR测定Na+，K+．ATPase 0【l及0t2亚基 DNA聚 中文摘要 增。扩增片段经2％琼脂糖凝胶电泳鉴定。