生物化学实验常用缓冲液的配制方法.docVIP

生物化学实验常用缓冲液的配制方法 1、0.2mol/L 磷酸缓冲液 *组份浓度 0.2mol/L （pH 6.0） *配制量 1L *配置方法 1.称取磷酸氢二钠 .12水 8.82 g。 2.称取磷酸二氢钠 .2水 27.34g。 3.用去离子水溶解并定容至 1L。室温保存。 注意：此为母液，使用时稀释 40倍使用。 2、洗脱液 *组份浓度 0.15mol/L （含 0.15mol/L 氯化钠的 0.005mol/L pH 6.0的磷酸缓冲液） *配制量 10L *配置方法 1.称取氯化钠 87.66g。 2.用 0.2mol/L pH6.0的 磷酸缓冲液 250mL溶解。 3.用去离子水稀释至 10L。室温保存。 3、0.3mol/L 磷酸缓冲液 *组份浓度 0.3mol/L （pH7.8） *配制量 0.5L *配置方法 1.准确称取磷酸氢二钠 .12水 49.150g。 2.磷酸二氢钠.2水 2.000g。 3.用去离子水溶解并定容至 0.5L。室温保存。 注意：此为母液，使用时稀释 10 倍使用。 4、0.2mol/L 乙酸缓冲液 *组份浓度 0.2mol/L （pH4.6） *配制量 2L *配置方法 1.准确称取乙酸钠 .3水 54.44g。 2.加入 23mL冰乙酸，溶解。 3.用去离子水溶解并定容至 2L。4℃保存。 5、0.2mol/L 磷酸-柠檬酸缓冲液（pH 2.6、4.6、6.6）*组份浓度 0.2mol/L *配制量 各 1L *配置方法 1.母液 A（0.2mol/L 的 Na2HPO4溶液）：称取 Na2HPO4.12 水 143.256g，用去离子水定容至 2L。 2.母液 B（0.1mol/L 的柠檬酸溶液）：称取柠檬酸 .1水 42.028g用去离子水溶解定容至 2L。 3. pH2.6、4.6、6.6的三种缓冲液如下表配制： pH值 A（mL） B（mL） 2.6 109.0 891.0 4.6 467.5 532.5 6.6 727.5 272.5 4.按上表混匀后， 4℃保存。 6、20×SSC 缓冲液 *配制量 1L（pH7.0） *配置方法 1.准确称取 175.2g氯化钠。 2.准确称取 88.2g柠檬酸钠 .2水。 3.溶解于 800mL去离子水中。 4.加入数滴 10mol/L 氢氧化钠溶液调节 pH值至 7.0。 5.加去离子水定容至 1L。 注意：按实验需要可分装后高压灭菌。 10×SSC、5×SSC、1×SSC 可由 20×SSC做相应稀释得到。 7、0.15mol/L 氯化钠-乙二胺四乙酸二钠缓冲液（pH8.0） *组份浓度 0.15mol/L *配制量 1L *配置方法 1.准确称取氯化钠 8.77g。 2.称取乙二胺四乙酸二钠 37.2g。 3.溶于 800mL去离子水中。 4.用固体的氢氧化钠调 pH 值为 8.0。 5.加去离子水定容至 1L。 8、1/15mol/L 的磷酸盐缓冲液（pH7.6） *组份浓度 0.15mol/L *配制量 1L *配置方法 1.溶液甲（1/15mol/L 的 KH2PO4溶液）：称取 KH2PO49.078g，用去离子水溶解定容至 1L。 2.溶液乙 (1/15mol/L 的 Na2HPO4溶液):称取 Na2HPO4. 2水 11.876g（或磷酸氢二钠 .12水 23.894g）用去离子水溶解定容至 1L。 3.pH7.6磷酸盐缓冲液：将 ①和②按 1.4：8.6比例混合即可。 9、5×TrisGlycineBuffer （SDSPAGE电泳缓冲液） *组份浓度 0.125M Tris，1.25M Glycine，0.5％（w/v）SDS *配制量 1L *配置方法 1.称取下列试剂，置于 1L烧杯中。 Tris 15.1g Glycine 94g SDS 5.0g 2.加入约 800mL的去离子水，搅拌溶解。 3.加去离子水将溶液定容至 1L后，室温保存。 10、5×SDSPAGE Loading Buffer *组份浓度 250mM TrisHCl（pH6.8） 10％（W/V） SDS 0.5％（W/V） BP