mIgY%2c一种新型的抗体及其抗体药物研发平台.pdfVIP

第十二次药理毒理学术讨论会 分子药理及舒方法 NF—KB信号通路的调节作用 苏子杰，施君，黄明，崔月明，韦英益，胡庭俊+① (广西大学动物科学技术学院，广西南宁530005) RAw264．7细胞线粒体氧化应激NF—KB信号通路的调节作用。【方法】以100斗g／mL、200pg／mL、400斗g／mL p65mRNA表达水平，观察4h、8h、 TNF—Q、IL一8含量，荧光定量PCR法检测细胞IL—lB、TNF一仅、NF—KB 12 h、24 B、TNF— d、NF—KBp65 B、 TNF一仅，升高IL一8水平；PcV一2感染RAw264．7细胞后显著IL一1 mRNA表达水平 p、TNF一仅、NF—KBp65 在4h、8h、12h显著下降，而在24 豆根多糖在24h不同程度升高细胞分泌IL—l h、8h、12h显著升高IL一1 p、TNF一仪，降低IL一8水平；在4 p、 ，I’NF一仅、NF—KB p65 RAw264．7细胞线粒体氧化应激，但其详细分子作用机制有待进一步研究。 关键词：山豆根多糖(sSP)；猪圆环病毒2型(PcV一2)；RAw264．7细胞；氧化应激 夺·夺·夺·夺·夺·夺·夺·{，·寸，·夺·夺·夺·夺·夺·夺·夺·夺·夺·寺·夺·夺·夺·夺·专·争·夺·争·夺·争·夺·争·夺·夺·夺·夺·夺·夺·夺·弓，·寺·夺-夺·争·夺·争·夺·夺·夺· mIgY，一种新型的抗体及抗体药物研发平台 张小莺+，陈红秀1一，江雪梅1，仇华吉2② 1．西北农林科技大学动物医学院，陕西杨凌712100；2．中国农业科学院哈尔滨兽医研究所 兽医生物技术国家重点实验室／猪传染病研究室，黑龙江哈尔滨150001 ① 本论文获国家自然科学基金项目资助。 }通讯作者：胡庭俊，男，教授，从事中兽药的研究与开发；E—mail：tin舀unhu@126．com。 ② 与教育部海外名师项目(No．MS2011xBNIJ057)支持。 1239；E—mail： 作者简介：张小莺，药学博士，教授，博士生导师，研究方向为药理学与抗体工程。联系电话：029—8709 zhang．xy@nwsuaf．edu．cn。 ·】37· 分子药理及颢方法 第十二次菊理毒理学术讨论会 化诱导表达条件，并用Ni+柱进行纯化。【结果】在噬菌体展示抗体文库中随机挑取的10个克隆，反应性均很 mM 高；诱导表达结果显示20℃，o．4 I胛G，10h为最佳表达条件；可溶性scFv抗体的终浓度为5mg／mL，经 ELIsA、westemblot和间接免疫荧光检测反应性良好，与鼠源单抗平行比较发现，鸡scFv反应性较鼠源单抗高。 抗进行比较，初步确认了禽源单抗的特殊优势；这些研究结果支持了构建禽源单克隆抗体研发平台的设想，不 失为一种有效的抗体研发替代途径。 守蛋白 参考文献 [1]张小莺，陈琛．卵黄抗体技术[M]．北京：科学出版社，2011．46—48． x of in virus