温润通络方对糖尿病大鼠大血管内皮细胞凋亡的影响.pdf

中文摘要 温润通络方对糖尿病 大鼠大血管内皮细胞凋亡的影响 摘 要 目的：温润通络方(由仙灵脾、桂枝、木瓜、白芍、 生地黄、女贞子、旱莲草、川芎、地龙、蜈蚣、五灵脂、生 蒲黄等药物组成)具有温通经络，养阴润燥，活血化瘀之功 效，为导师经临床观察筛选的效方，对糖尿病大血管并发症 具有较好的治疗效果。为了进一步探讨其作用机理，参照相 关文献制造糖尿病大鼠动物模型，同时施加药物干预，观察 了其对糖尿病大鼠大血管内皮细胞凋亡及相关调控基因的 影响，探讨了其抗细胞凋亡、保护大血管内皮的作用机制， 并运用HE染色方法观察了本方对大血管内皮组织形态学 的影响。 自由饮水进食，饲养于18℃~22℃明暗各12小时的清洁级动 物实验室内。正常喂养1周后，随机分为5组：正常对照组 通络方低剂量组(L)、阳性药(血府逐瘀汤)对照组(X)。 参照相关文献，除正常对照组外，其它各组大鼠腹腔注射 1％链脲佐菌素枸橼酸缓冲液(枸橼酸缓冲液为O．1mmol／L， 断尾取血测定血糖值，凡血糖值大于16．7mmol／L，大鼠尿 量及饮水量明显增多，则造模成功。正常对照组大鼠腹腔注 射相应体积的1％枸橼酸缓冲液。温润通络方高、低剂量组 中文摘要 以及血府逐瘀汤对照组，并用相应药物灌胃治疗，每天1 次，共灌胃8周。正常对照组和模型对照组给予生理盐水灌 胃，每天1次，每次用量体积均按lml／1009体重计算，共灌 胃8周。于末次灌胃后禁食不禁水12h，2％戊巴比妥钠腹 腔注射麻醉后取材制作标本。HE染色，光镜下观察大血管 内皮组织形态学变化。 结果： l一般行为观察 实验期间，正常组生长良好，饮食正常，反应灵敏，体 重增长明显。模型组大鼠很快出现多饮，多食，多尿，形体 逐渐消瘦，皮毛凌乱，色枯无泽，甚至有少量脱落，蜷卧扎 堆，活动减少，精神萎靡等表现。温润通络方高、低剂量组 及血府逐瘀汤对照组大鼠情况均较模型组为轻。 2温润通络方对实验性糖尿病大鼠大血管内皮组织形态学 的影响 结果显示，正常组细胞纹理清晰，走形正常，胞浆着色 均匀，动脉内皮细胞扁平，内膜平坦，中膜平滑肌细胞 (smoothmuscle cell，SMC)与弹力板平行相间排列。模型 组大鼠动脉壁出现局限性内膜增厚，中膜浅层平滑肌细胞 (SMC)可见增生、排列紊乱，病灶处的弹力板呈波浪状 或交织状排列，有断裂分离现象。温润通络方高、低剂量组 及血府逐瘀汤对照组的组织形态变化均比模型组有明显减 轻。 3温润通络方对实验性糖尿病大鼠血液流变学的影响 3。1各组大鼠血浆黏度比较： 中文摘要 (2．1 疗组血浆黏度均明显降低(PO．01或PO．05)。 3．2各组大鼠全血高切还原黏度比较： 与正常组全血高切还原黏度(4．19+0．36)比较，模型 组(7．57+0．28)，各治疗组(6．1 疗组全血高切还原黏度均明显降低(尸0．01)。 3．3各组大鼠全血低切还原黏度比较： 疗组全血低切还原黏度均明显降低(尸O．01)。 3．4各组大鼠纤维蛋白原比较： 8)、 蛋白原均明显降低。 4温润通络方对实验性糖尿病大鼠大血管内皮细胞凋亡率 的影响 ． 正常组比较，模型组大鼠股动脉内皮和主动脉内皮细胞 凋亡率显著高于正常组(尸O．05)。经药物干预后，各治疗 组与模型组比较，细胞凋亡率均明显减小，差别有统计学意 义(尸O．01)。其中，温润通络方低剂量组细胞凋亡率高于 高剂量组，差别有统计学意义(尸O．05)，而血府逐瘀汤对 照组与低剂量组比较无明显差异(胗O．05)。 中文摘要 5温润通络方对实验性糖尿病大鼠大血管内皮Bcl．2和Bax 蛋白表达的影响 与正常组比较，模型组大鼠股动脉内皮和主动脉内皮细 加，差别有统计学意义(尺O．05