豆粕品质的检测方法.docVIP

豆粕品质的检测方法 评定指标 1：抗胰蛋白酶的活性：Trypsin Inhibitor Activity TIA 大豆粕在0。01mol/LnaOH浸泡1h过滤,滤液用PBPA水解.测胰蛋白酶活性TIU. 2：尿酶活性（Urease Activity UA） 国际标准法（ISO）、PH增值法（ΔPH法）、扩散法、酚红法。CHINA规定ΔPH《0。4 在0.02-0.2之间是优质豆粕.UA与TAI几乎同步失活.在加热过度以前,TIA以全部失活. 3:蛋白质溶解度:(Protein Solubility)美国乔治大学:Dale Araba (1987)以检测豆粕是否加热过度.一定量的豆粕与0.2%NaOH溶液混合离心过滤,滤液凯氏测氮.PS70%,则加热过度,70-80%为适宜,测时其灵敏度不够,粒度影响,当粒度在60-80目时方稳定. 4：有效赖氨酸:赖与精氨酸属热敏性AA,高温时Lys与还原糖发生Maillard反应.测定法有:A染料结合法(DBL):二硝基氟苯(FDNB),三硝基磺酸(TNBS),酸性橙-12,茚三酮发生特异性呈色反应.B 高效液相色谱法(HPLC) 5：蛋白质的水溶解度和氮的水溶解度：蛋的质的水溶解度（PDI））） 熱處理對大豆粕中可代謝能量之影響 　　生大豆粕中的可代謝能量要比經熱處理的大豆粕來得低（Hill 及 REnner , 1960 ., 1963）。一般認定，含 48 %粗蛋白的大豆粕，每公斤約含有 2,440 仟卡的可代謝能量（NRC）。含有 10 個單位胰蛋白酶抑制因子的大豆粕樣品，其每公斤應有 2,575 仟卡的可代謝能量，但要是檢測出來的胰蛋白酶抑制因子大約在５個單位時，其可代謝能量可增至 2,740 仟卡（Mian 及 Garlich，1987）。 Parson 等人曾做觀察，發現去穀大豆添餵燒烤用肉雞及火雞時，其真正斤提供之可代謝能量，分別為 3,003 及 3,292 仟卡。在 107 ℃溫度下經 10 ~ 13 分鐘熱處理之大豆薄片，其每公斤可代謝總能量為 3,130仟卡，但是熱處理過度（即在 121 ℃的溫度下，經 121 分鐘的熱處理）的大豆薄片，其每公斤的可代謝總能則會降至 2,700 仟卡（Sibbald,， 1980）。 熱處理對大豆粕中蛋白質之影響 　　過去幾年來，曾有多種方法被用來檢測大豆粕是否加熱過度而影響其飼養價值。這些方法當中，包括有藉由甲醛滴定、甲酚紅染色法，以及橘色─Ｇ染劑染色法（orange - G? dye? binding），來測出其游離功能基（free functional? group）的方法；及藉由凱氏法或 Coomassie 藍色染劑染色法，來檢測其加熱後所產生具有螢光的衍生物，以及蛋白質的溶解度。 甲醛滴定法 　　Almquist 及 Maurer （1953）曾建議採用甲醛滴定法來評鑑大頭粕是否熱處理過度，其檢測結果之資料詳列如表７。經蒸煮過之大豆蛋白，其功能基會降低。 甲酚紅染色法 　　本染色法曾由 Olomucki 及 Bornstein（1960）作過詳細的描述。其檢測步驟為，採取 400 毫克的樣品，先經 1 mm 網目之篩網篩濾後，再置於 10 公撮之甲醛紅溶液中，然後一齊加以振動一個 時。本檢測法所用之甲醛染色液，係以 1 公撮含有 0.2 公克溶於 100 公撮（0.2%）酒精及 9 公撮（0.1 N）鹽酸混合液之甲醛紅溶液稀釋調製而成。上述稀釋液經離心處理後，其上層部份再到入一裝有 9 公撮（0.2 N）的氫氧化鈉溶液中，並測量其顏色的濃度。如果Ｘ＝大豆粕被染劑所吸收的量（mg），而Ａ＝在最適當濃度所吸收的染劑量（mmg）讀取。那麼Ｘ＝〔2.00－( 10 XA )〕。甲醛紅染色法與大豆粕熱處理間的相關性詳列如表８。 表７.以甲醛滴定作為大豆粕熱處理法的檢測指標 高壓蒸煮時間（分鐘） 以申醛滴定時，欲使 pH 值調至 9.0 時所需 0.05N 氫氧化鈉作用量（ML） 0 7.95 5 6.90 15 6.50 30 6.10 45 5.70 60 5.50 120 4.70 資料來源：Almquist 及 Maurer , 1953 表８.大豆粕熱處理程度與紅染色法間的關係 加熱程度 每公克大豆粕被甲醛紅吸收之重量（mg） 生大豆粕 2.0 ~ 3.0 熱處理不夠 3.3 ~ 3.7 適度熱處理 3.8 ~ 4.3 熱處理過度 4.3 以上 資料來源：Olomucki 及 Bornstein , 1960 橘色─Ｇ染劑染色法 　　Moran 等人（1963）曾就橘色染劑Ｇ染色法的檢測程序加以述說。大豆粕經高 壓蒸煮後，其橘色─Ｇ染色值會隨之降低，但由他們研究所獲得之數字（詳如表９）