生物工艺复习重点.docVIP

生物工艺了解生物反应过程的特点；熟悉生物产品分离；其余还有常用的浓缩、过滤、离心、蒸馏、干燥等 二、氨基酸生产 1、氨基酸:构成蛋白质的基本单位。结构通式如图示 可分为碱性及酸性和中性氨基酸 等电点：氨基酸是两性电解质，在碱性溶液中表现出带负电荷，在酸性溶液中表现出带正电荷，在某一定pH溶液中，氨基酸所带的正电荷和负电荷相等时的pH,称为该氨基酸的等电点。—氨基酸的浓度 羧基脱羧生成伯胺放出二氧化碳。目前普遍采用此法检测氨基酸的量。成盐反应，氨基酸中氨基和羧基分别与酸和碱反应生成盐的反应。如制味精。 成肽反应：氨基酸的氨基与另一个氨基酸的羧基脱水缩合，生成酰胺化合物的反应 与茚三酮反应：在弱酸性溶液中，与茚三酮供热可生成蓝紫色化合物 美拉德反应：氨基酸的氨基与糖类的羰基反应，生成棕色到黑色的类黑素物质 2、生产方法：蛋白质水解法、合成法、发酵法 菌种的扩大培养： 细胞菌体传代多次后会退化，导致活力不足，产酸降低等。故需进行纯种分离。纯种分离的方法：稀释分离和划线分离 菌种筛选流程：采样→分离→初筛→复筛 菌种特征：细胞通常为椭圆形至短棒杆状、棒状。革兰氏染色阳性等，培养特征有菌落圆形、平滑、微隆起，不透明等。生理特征主要有最适生长PH7—8，需氧或兼性厌氧等，最适生长温度25—37℃。 种子扩大培养流程：斜面试管菌种—→试管斜面活化培养→三角瓶摇床培养—→种子罐培养—→发酵罐 影响种子质量的因素：培养基、培养温度、PH，供氧状况等 3、谷氨酸发酵 谷氨酸合成途径：还原氨基化作用和转氨作用，以及谷氨酸合成酶的作用 生物素的影响：生物素需限量供应。是生产菌的生长因子，是羧化酶的辅基（主要包括乙酰羧化酶、丙酮酸羧化酶）。 原料淀粉水解糖的制备。需经糊化—液化—糖化，三个步骤，方法有酸水解法，酶水解法，以及酸酶结合水解法。。从水解糖液的质量及降低粮耗，提高原料等方面考虑，以酶水解法最好，结合法次之，酸水解法最差。 酸水解步骤：淀粉（加入水和蒸汽）--调浆—糖化---冷却—中和、脱色—过滤—糖液 其中糖化终点判断可使用无水酒精，滴一到2滴样品至酒精试管，若清亮透明则糖化完全。中和目的是调节PH,使糖化液中的杂质易除去。中和剂一般可用纯碱（碳酸钠）或烧碱（氢氧化钠）。 酶水解法可分为液化糖化两个步骤，液化的工艺分间歇式、半连续式、连续式三种。 影响淀粉水解糖质量的因素： 酸法：淀粉乳浓度、酸的种类和数量、糖化压力和时间、其他如设备、操作等因素 酶法：包括液化的因素（淀粉的种类、不溶性淀粉颗粒、淀粉浆浓度、液化程度等）以及糖化效果（菌种来也、酶的用量、酶的纯度、糖化条件、糖化时间等） 培养基成分：碳源（也是主要能源）、氮源、生长因子、无机盐类等，灭菌通常采用湿热灭菌法，可分为空消、实消、分消和连消。影响灭菌的因素主要有培养基内细菌种类，数量，灭菌温度，时间。除此之外还有培养基PH、成分、泡沫以及其中颗粒的影响。 空气净化见酶制剂 4、谷氨酸生产工艺条件控制： 温度的控制：可用二段温度控制法、前16h维持32—34℃，之后34—36 可用三段温度控制法、前12h32—33,12—24h33—34,zhihou 34—36 溶解氧：通过通风量来控制。 PH,通过流加脲控制，原则是低初尿，少量多次流加。 中间补料：补充生物素、营养盐或糖液等 泡沫见下 谷氨酸发酵动态图，课本P56—58，自行掌握 5、杂菌及噬菌体感染预防及处理方法略,课本比较详细 6、谷氨酸的提取 发酵液组成：4-8%的谷氨酸含量。之外还有菌体、蛋白质等 预处理方法：机械分离、加热沉淀、添加絮凝剂沉淀、 提取方法：等电点法、离子交换、金属盐法等 等电点法：谷氨酸等电点我3.22..影响结晶析出的因素有：谷氨酸的含量、温度和降温速度、加酸及终点PH、投晶种及育晶养晶的影响、搅拌、参堂、菌体、染菌以及其他物质的影响等 离子交换法提取：流程见书P72.影响交换的因素有树脂颗粒大小、粒扩散速度（包括交联度、温度、交换离子的性质），膜扩散速度和离子交换柱的填充等。 金属盐法提取原理：在发酵液中加入硫酸锌，调节PH使谷氨酸和硫酸锌作用，生成谷氨酸锌沉淀析出，然后加酸调节PH，将析出谷氨酸晶体。 工艺条件控制：硫酸锌的量、PH调节、谷氨酸锌盐的溶解、谷氨酸结晶析出、 离水洗。 影响因素：锌盐用量、PH控制、沉淀溶解条件的控制、 7、谷氨酸制味精步骤：中和、脱色、真空煮晶、分离、干燥等操作 中和谷氨酸与碳酸钠反应生成谷氨酸单钠盐（味精有效成分） 脱色。色素来源有（原料本身色素、设备受金属离子腐蚀、化学变化产生）。脱色采用物理吸附法、分粉状活性炭脱色和颗粒状活性炭脱色（包