全长商陆种子抗病毒蛋白及其与HBV核心蛋白融合原核表达蛋白抑制HBV复制的机制研究.pdfVIP

肾组织，行HE染色观察给药后肝、。肾组织的病理变化，免疫组化染色计算肝脏HBsAg阳性细 time 胞的数量，real RT-PCR澳tJ肝组织中HBV复制中间体mRNA水平。结果：构建的全长PAP 基因的原核表达质粒、PAP-HBc融合基因原核表达质粒经双酶切及测序，证实各基因正确地 插入到载体中，且读码框正确。诱导分离纯化得到的蛋白，经SDS—PAGE检测证实为目的蛋白。 与生理盐水组相比，45天时PAP组、PAP—HBe融合蛋白组对血清HBVDNA的抑制率分别为73％ 各组HE染色均未见肝。肾组织有明显病理变化。免疫组化染色显示PAP组及PAP-HBc融合蛋白组 mRNA 小鼠肝脏中HBsAgg日性细胞数量较生理盐水组减少。PAP组、PAP—HBc融合蛋白组的HBV 较生理盐水组少。结论：成功地构建了全长PAP基因及其与HBc融合的真核表达质粒，并纯化 出原核表达蛋白。PAP及PAP—HBc融合蛋白在慢性HBV感染小鼠体内对HBV有抑制作用，并未见 明显肝肾毒性。 天然商陆种子抗病毒蛋白抑制HBV复制的机制研究 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科430022陈西柳贺永文 【摘要】目的：商陆种子抗病毒蛋白(PAP-S)是由美洲商陆的种子中分离出的一种核 糖体失活蛋白，对多种动、植物病毒都表现出很强的抗病毒活性，且对RNA、单链DNA和双链 DNA病毒均有抑制作用。它在低浓度就能有效地抑制多种病毒的复制，并且不影响宿主细胞 的蛋白质合成。目前临床应用的抗HBV药物存在副作用较多、长期应用可产生耐药突变等缺 陷，且均不能抑制HBVcccDNA。因此，寻找新型抗病毒药物依然是慢乙肝临床研究的重要部 分。本文旨在探讨天然PAP-S在HBV转基因小鼠模型体内抗HBV的效果。方法：给药前，将24 只HBV转基因小鼠按照血清HBVDNA和nBsAg水平配对，分为阴性对照组、拉米夫定组、PAP-S 脉丛采血，荧光定量PCR法检测小鼠血清中HBV DNA含量，ELISA法检测血清nBsAg水平；取肝、 肾组织，行HE染色观察给药后小鼠肝、肾组织的病理变化，免疫组化染色计算肝脏HBsAg阳 time 性细胞的数量，real RT-PCR}贝f]肝组织中HBV复制中间体mRNA含量。结果：与生理盐水 组相比，45天时拉米夫定组、PAP—S DNA的抑制率分别 0．125mg／kg、0．25mg／kg组对血清HBV 113 全长商陆种子抗病毒蛋白及其与HBV核心蛋白融合原核表达蛋 白抑制HBV复制的机制研究 作者： 陈西柳， 贺永文 作者单位： 华中科技大学同济医学院附属协和医院感染科 430022 引用本文格式：陈西柳.贺永文 全长商陆种子抗病毒蛋白及其与HBV核心蛋白融合原核表达蛋白抑制HBV复制的机制 研究 [会议论文] 2011