045.洁净区（室）沉降平碟法对空气微生物监测.docVIP

赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 洁净区（室）沉降平碟法对空气微 生物监测 编 码 SOP-ZL-00-045 页 数 3—1 实施日期 制 订 人 审 核 人 批准人 制订日期 审核日期 批准日期 制订部门 质管部 分发部门 生产部、质管部 目 的：阐述洁净室和洁净区中沉降菌的测试条件和测试方法。 适用范围：适用于洁净室、洁净区、无菌区域（包括干净工作台）中的环境验证。 责　　任：生产部部长、质管部部长、QA检查员、洁净区操作者。 内 容： 1、标准：根据检验操作规程中药品生物测定法。 2、设备：高压消毒锅、恒温培养箱。培养皿：一般采用酸培养皿。 3、培养基及平皿制备：培养基一般采取肉汤琼脂培养基或兽药典认可的培养基。 3.1.将培养皿置于121℃湿热20分钟或180℃干热2小时。 3.2.将培养基加热融化，置于45℃时，在无菌操作要求下将培养基注入培养皿，每皿约15ml。 3.3.将培养基平置于30～35℃恒温培养箱中培养48小时，若培养基平皿上确无菌落生长，即可供采样用。 3.4.制备好的培养基平皿在2～8℃的环境中存放。 4、采样点：采样点的布置力求均匀，避免采样点在某局域过于集中，按照洁净区的面积大小，而制定最少采样点数目，在满足最少测点数的同时，还宜满足最少培养皿数（附件2）。工作区采样点的位置离地0.8～1.5米左右（略高于工作面）。并在关键设备或关键工作活动范围处增加采样点。 5、测试规则： 5.1.测试状态： 5.1.1.沉降菌测试前，被测试洁净室（区）的温湿度必须达到规定的要求。静压差、换气次数、空气流速必须控制在规定值内。 5.1.2.测试前被测试洁净室（区）已经过消毒。 5.1.3.测试状态有静态和动态两种，测试状态的选择必须符合生产要求，并在报告中注明测试状态。 赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 洁净区（室）沉降平碟法对空气微 生物监测 编 码 SOP-ZL-00-045 页 数 3—2 5.2.测试人员： 5.2.1.测试人员必须穿着符合环境洁净度级别的工作服。 5.2.2.静态测试时，室内测试人员不得多于二名。 5.3.测试时间： 5.3.1.对单向流（水平层或垂直层流），如100级净化房间及层流工作台，测试应在净化空调系统正常运行不少于10分钟开始。 5.3.2.对非单向流（乱流），如万级、十万级以上的精华房间。测试应在净化空调系统正常运行不少于30分钟后开始。 6、测试步骤： 6.1.培养：全部采样结束后（使培养基表面接触0.5小时）将培养皿倒置于恒温培养箱中，在30-35℃培养，时间不少于48小时。每批培养基应有对照试验，每批可选定3只培养皿做对照培养。 6.2.菌落计数：用肉眼直接计数，标记或在菌落计数器上点计，并用5～10倍放大镜检查，以防遗漏。 6.3.注意事项： 6.3.1.测试用具要灭菌处理，以确保测试的可靠性，正确性。 6.3.2.防止样品的人为污染。 6.3.3.对培养基、培养皿及其他设备做详细记录。 6.3.4.一般用透射光照射培养皿背面或正面仔细观察，应注意培养皿边缘生长的菌落，并注意菌落与培养基沉淀物的区别。 6.3.5.采样时仔细检查每个培养皿的质量，如发生变质，破损或污染的应剔除。 7、结果计算：用计数方法得出各个培养皿的菌落数，按下式计算： 平均菌落数M=M1+M2……Mn/N 式中：M1=1号培养皿的菌落数 M2=2号 Mn=n号 N=培养皿总数 8、结果：用平均菌落数判断洁净室（区）空气中的微生物。 8.1.洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定标准。 8.2.若某洁净室（区）一天内的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先进行消毒， 赣州亿圆生物药业有限公司 操作标准----质量管理 文件名称 洁净区（室）沉降平碟法对空气微 生物监测 编 码 SOP-ZL-00-045 页 数 3—3 然后重新取样2次，测试结果均须合格。 9、记录：测试报告中应记录房间温度、相对温度、压差及测试状态。记录必须有日期和实验员签名，并交微生物实验室负责人会签。 记录本应保留至最后一次记录后的两年。 存档处必须在记录本中注明。