脐带间充质干细胞无血清和含胎牛血清培养体系比较.pdfVIP

第28卷 第9期 重 庆 理 工 大 学 学报 (自然科学) 2014年 9月 Vo1．28 No．9 JournalofChongqingUniversityofTechnology(NaturalScience) Sep．2014 doi：10．3969／j．issn．1674—8425(z)．2014．09．013 脐带间充质干细胞无血清和 含胎牛血清培养体系比较 陈 林，张 坤，董 伟，杨 珂，艾 辉，陈禄华 (重庆市干细胞企业工程研究中心，重庆 401320) 摘 要：为了比较在无血清与含胎牛血清培养基中人脐带间充质干细胞的增殖能力、生物 学特性、分化潜能，将脐带华通氏胶剥出剪碎 ，分别在无血清与含胎牛血清培养基中培养扩增脐 带间充质干细胞。用M1Tr法检测细胞增殖活性，并绘制生长曲线；在倒置显微镜下对细胞形态 进行观察；利用流式细胞仪检测鉴定其表面标记 CD73，CD90，CD105，CD14，CD34，CIM5，CD79a 及 HLA-DR的表达；将成骨及成脂诱导液培养 1—2周后观察其细胞形态学变化，用碱性磷酸酶 染色鉴定其成骨情况，油红0染色鉴定其成脂情况。结果表明：无血清与含胎牛血清培养基所 培养的人脐带间充质干细胞在细胞形态、增殖活性、表面标记和分化潜能相似；但在无血清培养 基成分中无动物源蛋白引入，是更理想的人脐带间充质干细胞培养基种类。 关 键 词：间充质干细胞；细胞培养；无血清培养基；胎牛血清 中图分类号：Q2—33 文献标识码：A 文章编号：1674—8425(2014)09一、0057—05 ComparisonoftheUmbilicalCordM esenchymalStem Cells CulturedbySerum-freeM edium andFetalBovine Serum ．containedM ediam CHEN Lin，ZHANG Kun，DONG Wei，YANG Ke，AIHui，CHEN Lu—hua (ChongqingEnterpriseEngineeringResearchCenterofStemCell，Chongqing401320，China) Abstract：Tocomparethedifferencesofproliferation，biologicalcharacteristics，differentiationpoten- tial ofserum．．freeandfetal bovineserum．．contained medium culturedhuman umbilicalcord．．derived mesenchymalstemcells．SeparatedWharton’Sjellyfromhumanumbilicalcord，culturedumbilical cordmesenchymalstem ceilsinserum—freemedium andserum-suppliedmedium．Detectedthecells’ proliferationratebyMTImethodandgetthecellgrowth curve ；observethecellmoprhologybymi- croscope；Use flow cytometerto identify surfacemarkersCD73，CD90，CD105，CD14，CD34， CD45，CD79a，andHLA-DR．WeobservecellschangeofshapeaftercellsculturedbyOsteogenesis Differentiation andAdiposenessDifferentiationmedium．Usealkalinephosphataseandoi1redO stai一 收稿 日期：2014—03—16 作者简介：陈林 ，男 ，四川I德阳人 ，主要