分子印迹技术在多肽蛋白质分离中的应用（综述）.pdfVIP

第 16 卷 第 4 期 盐城工学院学报 自然科学版 Vol. 16 No. 4 2003 年 12 月 Journal of Yancheng Institute of Technology Natural Science Dec. 2003 分子印迹技术在多肽、蛋白质分离中的应用 戴　勇 盐城工学院 化学工程系 ,江苏 盐城 　224003 摘 　要 :介绍了分子印迹聚合物 Molecularly Imprinted Ploymer ,MIP 在分离生物大分子 ———多 肽、蛋白质等领域中的应用进展 ,及其发展前景。 关键词 :分子印记技术 ; 分子识别 ; 多肽 ; 蛋白 中图分类号:O631 　　　文献标识码 :A 文章编号 :1671 - 5322 2003 04 - 0046 - 04 分子印迹技术是利用受体 - 抗体作用机理 , 结合生物化学、结构化学、材料化学等学科发展起 来的新兴交叉学科。通过以特定分子为模板 ,制 备具有固定空穴大小和形状及特定排列功能基团 的交联高聚物 ,可实现对模板分子的选择性识别。 分子识别在生物活性方面发挥着重要作用 , 大多数生物分离技术都依赖于分子识别作用。 1973 年 ,Wulff 等利用酶和抗体具有分子形状、空 图 1 　分子模板聚合物制备原理 间结构选择性的特点 ,制备了对特定分子有特殊 Fig. 1 　Schematic depiction of the preparation 识别功能和高选择性材料的分子印迹聚合物并可 of molecular imprint 用于色谱手性拆分的。 [4 ] [5 ] 分子 、除草剂 等分析检测、分离与纯化。其 分子印迹技术的核心是制备分子印迹聚合 中印迹聚合物最引人瞩目的应用领域是作为抗体 物 ,其制备原理为 : ⑴在合成高分子前 ,将待分离 和酶的模拟物 ,MIP 对目的物的专一结合性类似 物质 即印迹分子、模板分子 加入能与之发生分 于抗体 - 抗原的结合特性。从应用的角度来看 , 子间作用的功能单体中 ,形成复合物 ; ⑵然后通过 基于稳定、高效、高活性的分子识别的 MIP 是一 加入交联剂、引发聚合反应 ,形成高度交联的固态 种高效、低成本的途径 , 以MIP 为基础的亲和分 高分子 ,把这种作用固定下来 ; ⑶接着利用化学或 离与利用抗体相比 ,具有更好的物理和化学稳定 物理方法将印迹分子从高分子中移去。当印迹分 性、机械稳定性和热稳定性。 子被除去后 ,聚合物中就形成了与印迹分子空间 1 　分子印迹聚合物的应用 匹配的具有多重作用位点的大量空穴 ,且孔穴内 各功能基团的位置与所用的模板分子互补 ,可与 基于抗体 - 抗原反应的免疫分析以其高特异 模板分子发生特殊的结合作用 ,从而实现对模板 性和高灵敏度等特点 , 已得到广泛应用。但是天 分子的识别。如果模板分子可以反复洗脱和吸 然生物抗体由于缺乏保存和操作的稳定性 ,在某 附 ,则该分子印迹聚合物可以多次使用。如图 1 些领域限制了它们的进一步应用。近年来出现的 所示。 利用分子印迹技术制备的人工抗体由于具有类似 最近几年该技术应用研究十分活跃 ,涉及的 生物抗体的高亲合性和高专一性 , 同时又耐热、耐 范围很广 ,如氨基酸[1 ] 、糖类[2 ] 、金属离子[3 ] 、药物 酸、耐碱且又可以长期稳定 ,因此已引起人们的极 收稿日期 :2003 - 09 - 18 作者简介 :戴 　勇 1975 ,男 ,江苏建湖县人 ,盐城工学院助教 ,南京工业大学在读硕士研究生。 第 4 期 戴 　勇 :分子印迹技术在多肽、蛋白质分离中的应用 ·47 · 大兴趣[6～7 ] 。 2 　表面印迹技术 [8 ] 朱庆枝 利用分子印迹技术 ,制备了卵清白 尽管包埋印迹技术比较简单 ,但存在着不少 蛋白 EA 的人工抗体 ,研究了其对抗原的特异性 吸附能力 ,在此基础上 ,模拟竞争型免疫反应 ,并 弊端 ,如印迹分子利用率低 , 印迹分子不易洗脱 , 建立了卵清白蛋白的仿生荧光免疫分析方法。 介质内部扩散阻力质使模板分子难已到达识别位 Maria Kempe [9 ] 以甲基丙烯酸为功能单体制备 点。而表面印迹法能很好地克服这些弊端。通常 了 Z - D - Ala - Oly - D - Phe - Ome 的模板聚合 采用的表面印迹法是在微球载体表面进行修饰或 α 涂层制备分子印迹聚合物材料的一种方法 ,其优 物 ,其分离因子 为 1. 84 ,经色谱分析能够与 Z - L - Ala - Oly - L - Phe - Ome 达