耐高温α- 淀粉酶高密度高表达发酵的条件优化.pdfVIP

※生物工程 食品科学 2012, Vol. 33, No. 01 219 α- 1 1, 2 1, 2 2 2, 2 3 4 胡建恩 ，曹 茜 ，杨 帆 ，房耀维 ，王淑军 * ，吕明生 ，葛 亮 ，李 瑛 (1.大连海洋大学食品科学与工程学院，辽宁 大连 116023 ；2.淮海工学院海洋学院，江苏 连云港 222005 ； 3.上海海洋大学食品学院，上海 201306 ；4.江南大学生物工程学院，江苏 无锡 214122) ：通过摇瓶实验对产耐高温α- 淀粉酶的重组菌 E. coli BL21 的高密度高表达发酵条件进行研究。考察不同培 养基和不同发酵条件对该菌株产耐高温 α- 淀粉酶的影响，并利用正交试验进行优化。结果表明：在葡萄糖 0.5g/L ， 酵母粉 15g/L，pH6.5 ，诱导时机为接种后发酵4h ，诱导时间为6h ，IPTG 添加量为 0.8mmol/L ，接种量为体积分 数 3% 的优化条件下，该重组菌发酵液菌体生物量为原来的 1.29 倍，酶活力达到 8.754U/mL ，是原来的 1.55 倍， 目的蛋白的表达量也为原来的1.24 倍。 ：耐高温 α- 淀粉酶；大肠杆菌 BL21 ；发酵培养基；发酵条件 Optimization of Fermentation Conditions for High Cell Density Cultivation and High Hyperthermophilic α-Amylase Expression in Recombinant E. coli 1 1,2 1,2 2 2, HU Jian-en ，CAO Qian ，YANG Fan ，FANG Yao-wei ，WANG Shu-jun *， . . 2 3 4 LU Ming-sheng ，GE Liang ，LI Ying (1. College of Food Science and Engineering, Dalian Ocean University, Dalian 116023, China；2. School of Marine Science , Huaihai Institute of Technology, Lianyungang 222005, China；3. College of Food Science and Technology, Shanghai Ocean University, Shanghai 201306, China ；4. School of Biothechnology, Jiangnan University, Wuxi 214122, China) Abstract ：In order to achieve high-cell-density cultivation and high expression of recombinant E. coli BL21 producing hy