脓汁和粪便标本中病原菌的检测3.pptVIP

转换物镜 A.旋转物镜转盘①，将希望使用的物镜（10×、100×）转到标本的上方。 聚焦 注：10倍物镜的工作距离为10.5mm。油镜的WD为0.13mm。 A.从显微镜侧面观察，按箭头方向转动粗调旋钮①，使载物台上的标本尽可能接近物镜③。 B.一边看目镜，一边慢慢逆箭头方向转动粗调旋钮①， 使载物台下降。 C.看到标本以后，用微调旋钮②来正确对焦。 100倍浸油物镜使用方法 A.油镜放入光路之前，一定要在标本的观察部位上加一滴浸油。 B.旋转物镜转盘，使油镜进入光路，用微调旋钮对好焦距。 C.如果浸油内有气泡，会影响观察，可稍微旋转物镜转盘，使油镜来回通过1～2次浸油，排除油内气泡。 香柏油折射率n=1.515 空气的折射率n=1.000 玻璃的折射率n=1.520 油浸镜的原理 光线 滴加香柏油可使光线更多进入物镜,避免光线通过折射率低的空气而散失,以提高物镜的分辨率,使物象明亮清晰。 放大倍数：目镜10倍×物镜90或100倍。 奥林巴斯 CX21型 生物显微镜 （实验柜内，每人一台） 注意：只能横放，不得竖放。 显微镜油镜的使用P13 将标本放置、移动到光路上，用“黄色圈”的10×物镜找到、看清楚标本。 将聚光器调到最高处。 调整孔径光阑,将与物镜相对应倍率调到正面（10×→100×） 在标本观察部位上滴加一滴香柏油。 将“白色圈”100×物镜放入光路，浸泡于香柏油中，可看到模糊物象。 调整亮度及微调旋钮，直到物象清晰为止→观察物象，记录结果→关闭电源。 油镜处理：擦镜纸拭去香柏油 →擦镜纸沾少许乙醇和乙醚（7:3）混合液擦拭→擦镜纸擦拭油镜。 显微镜罩上防尘罩→ 横放在实验柜内。 ※ (顺德校区）实验台两侧的电源插座，只能插入一个插头，请选择离你最近的电源插座。 ※（校本部）实验台中间，三个位的插座，中间那位插孔没有电，不能使用，只能用两侧的插座。 医学微生物学实验综合性实验三、一 空气、手指皮肤的细菌学检查结果分析 脓汁和粪便标本中病原菌的检测 菌落特征观察P11 细菌纯培养P10 油镜使用方法（讲解） 脓汁标本检验 （录像） 肠道致病菌的分离鉴定（录像） ①试管用毛刷，上下、旋转刷洗内壁和管底。 ②字迹用湿纱布，粘去污粉擦拭。 ③管口朝向相同，流水冲洗10次。 ④洗干净的试管，倒扣在筐内，晾干。 平皿用纱布，旋转擦拭内外侧，字迹用纱布粘去污粉擦拭。 流水冲洗10次。逐个倒扣在筐内，晾干。 思考题 在微生物学实验中,怎样才能避免杂菌的污染? 空气的卫生标准规定如何? 你的实验结果说明了什么问题? 怎样从医务人员手指上分离和鉴定金黄色葡萄球菌? 菌落特征主要描述哪几方面问题？如何挑选单菌落？ 常用器材摆放顺序：电源插座→试管架→酒精灯→污物盘。 试管架上器材：靠近插座一侧第1列放置接种针,第2列放置 接种环，另一侧中间两行放置油性笔和打火机。 ※器材使用后，必须放回原处，依次摆整齐。 实验器材 整齐有序 * 斜面4支，空气、手指皮肤、细菌分离培养物（上次实验平板） 器材准备 空气细菌检查结果分析 细菌菌落直径1～3mm，有光滑型、粗糙型、粘液型。 霉菌菌落比较大，呈棉絮状、绒毛状。 霉菌和酵母菌最适培养温度为25℃～28℃。 计数菌落形成单位（CFU）,报告结果。 37℃培养24小时→室温放置 → 48小时 → 72小时 空气的细菌学检查（结果录入） 组号 采样时间(min) 采样地点 菌落形成单位(CFU) 1 15 2 15 3 15 4 15 5 15 6 15 7 15 8 15 9 15 10 15 CFU /m3 ＝ 50,000N÷AT ≈86N、66N、52N(直径7cm、8cm、9cm平板） N：平板上的菌落数 A：平板面积(厘米） T：采样时间(15分钟) CFU：colony forming unit WHO推荐的医院各部门空气细菌标准 级别 cfu/m3 适用范围 Ⅰ级区 ＜10 器官移植、心血管、矫形等外科手术室，保护性隔离室等，灌注或配制注射液实验室 Ⅱ级区 ＜200 无菌室、手术室、供应室、婴儿室、中心灭菌单位、术后恢复室、早产儿及产房、重症监护病房 Ⅲ级区 200～500 一般病房、治疗室、放射室、衣帽室、按摩室、盥洗室、小手术室浴室 Ⅳ级区 传染病科、同位素室 Ⅴ级区 卫生间、贮藏室、太平间等 我国公共场所空气卫生细菌学标准 （GB9663～9673-1996，GB16153-1996,平皿直径9cm） 撞击法cfu/m3 沉降法个/皿 适用范围 ≤1000 ≤10 3～5星级宾馆、饭店 ≤1500 ≤20 2星级以下宾馆和非星级带空调宾馆、饭店 ≤2500 ≤30 普通饭店、招待所、酒吧、茶座、