酶基因启动子区的克隆及其功能初探.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’() * ! +( * # 年 月 $%%! !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 ,-. $%%! !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 香蕉果实特异性! 合酶基因启动子区的克隆及其功能初探 王新力 彭学贤 （中国科学院微生物研究所植物生物技术实验室 北京 !%%%5% ） 摘 要 根据本实验室所获得的香蕉果实特异性2CC 合酶BD+2 序列，以改进的接头连接ECF 方法通过两次步行 从香蕉基因组中分别扩增并克隆了其基因G旁侧区近端 !H$IJ 和远端 !H6IJ 的片段。通过拼接，构建出含有 启动子区和转录起始位点下游 的共 的基因 旁侧区片段；其启发性动子区中 至 为推测 $%J 56J $1!J G /#K /$5 的 盒序列， 至 为推测的 盒，与其它植物基因启动子结构相类似。将 启动子片段与 葡 3232 /!5 /!K6 CC223 $ HIJ / ! 糖苷酸酶（ ）基因编码序列融合，用基因枪法将构建的嵌合基因转入香蕉叶、根和果实的细胞后，只在果实细胞 LMN 中观察到报告基因的瞬时表达，从功能上证明了此$ HIJ 的启动子片段具有指导报告基因在香蕉果实中特异性表 达的作用。同时构建 个含不同 端缺失启动子与 融合基因的表达载体。瞬时表达结果表明可能负责果实特 G LMN 异性表达的调控区存在于转录起始位点至O !!!! 的启动子区中，而在O !!!! 至O 6%5 区间可能存在一个正控制区。 关键词 香蕉，果实特异性， 合酶基因启动子，瞬时表达 2CC 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） P51 2 !%%%/#%6! $%%! %#/%$1#/%K 启动子在基因表达调控中起着重要的作用。对 # 材料与方法 于植物果实相关基因启动子的研究目前主要集中于 双子叶植物当中；研究较深入的有番茄的 9K 基 #$ # 材料 ［］ ［］ ［］ ! $ # 香蕉（ ）叶和根取自香蕉组培苗 因 、 基因 、多聚半乳糖醛酸酶（ ）基因 和 3)+ +0)4#$+/+ 95 EL ［］ K 移栽 个月的幼株；香蕉果实为贮存于 的成熟 $2!! 基因的启动子 ，以及苹果的果实成熟相关 !/ 6