酸奶中嗜热链球菌的分离及鉴定.pdfVIP

( ) 2007 年第 3 期 牡丹江师范学院学报 自然科学版 No . 3 ,2007 ( 总第 59 期) J ournal of Mudanj iang Nor mal U niver sit y Tot al No 59 酸奶中嗜热链球菌的分离及鉴定 弥春霞 ,代志平 ,杨蕾 (牡丹江师范学院生物系 ,黑龙江 牡丹江 1570 12) 摘 　要 :对黑龙江省牡丹江市“三道”牌酸奶的乳酸菌进行了分离 ,分离培养基 BC G 牛乳培养基. 分离得纯 菌 ,革兰氏阳性 ,链球状排列 ,能发酵葡萄糖产乳酸 ,确定其为嗜热乳酸链球菌. 关键词 : 嗜热乳酸链球菌 ;分离 ;纸层析 ;酸奶 [ 中图分类法] Q58 　　　　[文献标识码]A 　　　　[文章编号] 1003 - 6 180 (2007) 03 - 0035 - 02 　　酸奶是经乳酸菌发酵的乳类 ,是一种人们非 发酵产物鉴定 ———纸层析法 　将分离的纯菌 常喜爱的发酵食品. 具有维持肠道菌群平衡 、增加 种接种到乳酸菌葡萄糖发酵培养基上 ,40 ℃培养 免疫功能、降低血浆和肝脏的胆固醇含量 、抗肿 48 h . 取产酸不产气的液体试管中发酵液做纸层 瘤 、延缓机体衰老等保健作用. 黑龙江省牡丹江市 析. 展开剂 : 水 30 mL 、苯 甲醇 150 mL 、正丁醇 生产的“三道”牌酸奶所用的乳酸菌种为保加利亚 150 mL 、甲酸 3 . 3 mL . 显色剂 :将 1. 6 %的溴酚蓝 乳杆菌和嗜热链球菌 ,在普通细菌培养基上菌落 酒精溶液用 0 . 1 mol/ L 的 N aO H 调 p H 到 6 . 7 . 生长较小 ,不易被观察到 ,分离具有一定的困难. 显色后 , 分别测定发酵液与 2 %标准乳酸 的 Rf 本实验建立了实验室快速分离和鉴定嗜热链球菌 值 ,确定发酵产物中是否有乳酸. 的方法. 牛奶发酵实验 　将分离的纯菌种活化后 , 以 1 　材料与方法 2 %的接种量接入牛乳培养基中 ,摇匀后 ,将瓶盖 拧紧密封. 将三角瓶置于 40 ℃恒温箱中培养 , 出 1. 1 　分离培养基 现凝固后转入 4 ℃冰箱中冷藏 24 h . ( ) BCG 牛乳培养基 　 A 溶液 :脱脂乳粉20 g , 2 　结果与分析 水 100 mL ,加入 1. 6 %溴甲酚紫乙醇溶液0 . 2 mL , 2 . 1 　乳酸菌分离与纯化的结果 80 ℃灭菌 20 min . (B) 溶液 :酵母膏 2 g ,水 100 mL , 琼脂 4 g ,12 1 ℃湿热灭菌 20 min . 以无菌操作趁热 酸奶稀释涂布平板培养 48 h 后 ,在 B C G 牛 ( ) ( ) 将 A B 溶液混合均匀后倒 8 个平板. 乳培养基上有很多黄色菌落 ,菌落周围培养基变 乳酸菌葡萄糖发酵培养基 　蛋白胨 0 . 5 g ,牛 为黄色 ,此即为嗜热链球菌疑似菌落. 菌落特征 肉膏 0