金霉素发酵过程的代谢特性及调控策略.pdfVIP

维普资讯 中国抗生紊杂志2002年3月第27卷第3期 14l · 文章编号：1001．8689c2O02}∞．01414)4 金霉素发酵过程的代谢特性及调控策略 扶教龙 储炬 刘玉伟 樊涛 庄英萍 彭皓宇 张嗣良 (华东理工太掌生鞫l反应器工程国家重点实验室， 上海200237) 摘要： 利用金霉紊链霉菌在 50L自控发酵罐中发酵生产金霉索。分析了发酵过程的糖、氧、氮和磷的 代谢特性以及菌体生长和金霉紊生物合成的规律。结果表明，菌体前期的代谢控制显得非常重要．并对金霉 紊台成的整个过程起决定性作用。在参数相关理论的基础上，通过对发酵过程的实时优化，适宜增强前期的 菌体生长，使物质代谢流有利于流向金霉素形成的途径，从而使金霉紊的产率(效价)提高了10．3％。 关键词：金霉索；金霉紊链霉菌；发酵；代谢调控 中图分类号： TQ46S．4 文献标识码：A 金霉素 (chlortetracycline，即CTC)是属于四环素类 性、不确定性和相关偶合性，使发酵过程呈现出非常复 的一种广谱抗生素，在医疗、畜牧业和农业上有广泛的 杂的特点 。 用途。尤其在畜牧业上是用于饲料药物添加剂的八大 由于发酵过程酶学研究的困难，以及过程数据采 抗生素产品(金霉素，泰乐星和土霉素等)之一，金霉素 集和处理的困难，发酵工艺优化研究的基本思路仍旧 以其抑菌、促生长、饲料利用率高、在肌体 内残留量低 是寻找最佳培养基配方和最佳的操作条件，其本质是 的特点以及其生产技术成熟和生产成本低的优点，成 以细胞代谢流为控制要点，使物质代谢最大程度地流 为了目前及今后较长一段时间内在饲料工业中用量最 向目的产物形成的代谢途径。本文在50L自控发酵罐 大的抑菌促生长剂。我国的金霉素产品已出口到欧洲 上，采用多参数检测和控制系统，以数据驱动型方法对 和美国等发达国家。目前 ，工厂的金霉素效价一般在 发酵过程参数趋势曲线进行相关分析-，较深入的分 lS000u／ml(不完全释放效价，下同)左右 因此，提高 析和研究了CTC发酵过程的糖、氧、氮和磷代谢状况， CTC的效价成为厂家的当务之急。这既能提高产品的 揭示了该过程的代谢特点及菌体生长和产物形成的规 竞争力，又能为厂家带来可观的经济效益。 律，提出了相应的调控策略。 cI℃的生物合成机制很复杂，在CTC的合成过程 1 材料和方法 中，不同阶段对应不同的(占主导地位的)糖代谢途径。 1．1 菌种和培养方法 在菌体生长期，主要为糖酵解途径；在产抗生素期，则 菌种：金霉 素链 霉 菌 (Streptomycesameofaclens) 遵循戊糖循环途径 。其实，在发酵至 12～20h，戊糖途 9l 径即已参与到葡萄糖代谢中。CTC的合成需要还原型 培养基成分：淀粉、黄豆粉、玉米浆、酵母粉 、硫酸 辅酶lINADPH作为H 的受体以构成聚酮体衍生物， 铵、磷酸二氢钾、氯化钠等。 而NADPH只来 自戊糖循环途径 ，可见戊糖循环途径对 培养方法：种子经过20h左右培养后移人发酵罐； CTC合成是至关重要的。另外，CTC的合成也与三羧 在发酵罐中作补料分批培养，进行金霉素的发酵生产 酸循环和脂肪酸代谢密切相关，因为CTC的合成途径 过程，到 120h左右放罐。 是由乙酰辅酶A到三羧酸循环、脂肪酸的合成和 cI℃ 12 实验装置 的形成等三条代谢途径之一。研究发现，低产菌株的 发酵培养装置(发酵罐和过程参数检测与