酿酒酵母及拟南芥PRE-MRNA剪接位点的比较.pdfVIP

技经济市场 酿酒酵母与拟南芥 Pre—mRNA剪接位点的比较 申杰华 (南昌大学生命科学学院，江西 南昌330031) 摘 要：RNA剪接是一个多步骤、形成多种中间状态复合物的复杂过程。跨物种的基因表达更显得复杂，RNA剪接是基因表 达调控中重要的步骤。这里讨论酵母和植物的剪接位点保守序列的差异，指出可能对植物基因在酵母中表达有重要作用的 顺式作用元件。 关键词 ：RNA剪接；剪接体；剪接因子；跨物种表达；剪接位点 酿酒酵母细胞繁殖快 ，操作简便，属于真核模式生物。将植 一 系列的RNA—RNA间的相互作用和重组的改变，剪接反应发 物的基因放入酵母中表达 ，在于能用酵母细胞大量表达植物蛋 生了。剪接后，间接产物和剪接后复合体被释放，内含子被降解， 白。在 2002年有一篇论文关于植物mRNA前体在裂殖酵母 中 剪接体结合在内含子上而后进入新的一轮循环中同。 的剪接和 1983年的跨物种基因表达的研究。l1I 4 mRNA前体剪接因子 RNA 接 (RNAsplicin 是 tRNA、rRNA，牢孚别是 mRNA加 4．1SR蛋 白 工与成熟的重要生物学过程，也是蛋白质分子多样性产生的关 sR蛋白家族是近些年来为人们广泛关注的一类剪接因子， 键机制之一，在基因表达调控中扮演着重要的角色l2l。RNA剪接 它在剪接复合体的聚集形成 ，以及剪接因子在mRNA前体链上 需要多种因子参与，包括杂性核RNA (hetemgeneousnuclearI 结合位点的识别过程中起着关键作用 。其成员包括 sc35 A，hnRNA) 结 合 蟹 自 hnRNP (hetemgeneous nuclear (spJiesome comp0nent 35kD)、sF2，AsF (splicing fact0r rib0nuc1eopmtein)、，J、型核 RNA (sma1lnuclearRNA，snRNA)结 2，altemative splicing factnr)、sRP20、SRP30、SRP40、SRP55 和 合 蛋 白 snRNP (smallnuclear 0nucle叩mtein)等 。 核 sRP70等。sR家 族 剪接因子的结构特点是氨基酸序列中富 pre—mRNAs剪接由剪接体执行，剪接体包含有5种 (u】，u2， 含丝氨酸一精氨酸残基。其中RNA结合结构域 fRNAbindi u46／，和u5)snRNPs和其他non—snRNP剪接因子。3【】在真核细胞 domain)位于氨基末端(N末端)，具有结合RNA的能力。而位于竣 内，RNA原初转录物的分子很大，通过剪接产生成熟的mRNA 基末端的是含不同丝氨酸和精氨酸残基数量的Rs结构域 s 分子． domain)，它能够与具有 RS结构域的u2AF(u2auxi1iaryfact0r)的 1 Pre—RNA剪接反应机制概述 35kD亚基和u1snRNP7OkD的蛋白质相互作用，因而能够促进 真核生物细胞核基因初始转录物(pre—mRNA)剪接由两步连 u2AF和ulsnRNP与剪接位置结合。所以，sR蛋白在高等真核 续进行的转酯反应完成(Padgett，l984Ruskin，1984)。首先，分支 生物细胞中介导U1snRNP同5’剪接位点结合与 U2AF同3’剪 位点(branchsite】处的腺苷酸2’羟基亲核攻击 5’剪接位点的3’ 接位点结合，起着 “桥”的作用。关于 sR蛋白在选择性剪接中对 一 5’磷酸二酯键，产生两种剪接中间体分子 ：一为5’外显子对 剪接位点的调控，主要是通过与不同的几个顺式调节因子作用。 应的线性RNA分子；～为 由内含子 5’一端鸟苷酸与分支点腺 如通过与外显子的剪接增强子 (exonicsplicingenhancer，ESE)、 苷酸之间通过2’一5’磷酸二酯键形成的套索状分子 ，该分子包 内含子的剪接增强子 (intmnicsplicingenhancer，ISE)、外显子的 含了内含子和 3’外显子序列