_群禽腺病毒五邻体基因克隆及原核表达_罗思思.pdfVIP

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广东农业科学 年第 期 154 2011 7 Ⅰ群禽腺病毒五邻体基因的克隆及原核表达 1 2 2 2 2 2 2 2 罗思思 ,谢芝勋 ,邓显文 ,刘加波 ,庞耀珊 ,谢志勤 ,谢丽基 ,彭宜 ( 广西大学动物科学技术学院,广西南宁 ; 广西兽医研究所,广西南宁 ) 1. 530005 2. 530001 摘 要:根据 中 群禽腺病毒( )基因组序列,设计了 对特异性引物。 以 毒株基因组 为模板,通过 扩 GenBank I AAV 1 CELO DNA PCR 增出结构蛋白五邻体基因 (penton ), 将其克隆到原核表达载体pGEX-4T-1 的EcoR I和Xho I位点, 构建了原核表达载体pGEX- 。 将其转化到感受态细胞 中,经 诱导, 分析,获得了 的融合蛋白。 用不同的 浓度和时间诱导 penton DH5α IPTG SDS.9 ku IPTG 表达,得出诱导的最佳 浓度为 ,最佳时间为 。 用尿素提取包涵体表达产物,得到 纯化蛋白,浓度为 IPTG 1.5 mmol/L 4 h penton 2.98 mg/mL 。 经Western-bolt分析,该蛋白具有良好的反应原性。 关键词: 群禽腺病毒;克隆; ;原核表达 Ⅰ penton 中图分类号 + ; 文献标识码 文章编号: ( ) :S852.65 9.1 Q785 :A 1004-874X 2011 07-0154-04 Cloning and prokaryotic expression penton gene of Aviadenovirus Group

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