阿米洛利对高转移肺癌细胞侵袭能力和uPA系统的影响.pdfVIP

2010年第37 卷第5 期 中国肿瘤临床 241 · · 基础研究 阿米洛利对高转移肺癌细胞侵袭能力和uPA系统的影响* 徐 彬 施静雯 毛建文① 观察阿米洛利对人高转移肺癌细胞PGCL3 体外侵袭能力和尿激酶型纤溶酶原激活物（urokinase-type plasminogen 摘要 目的： activator ，uPA ）系统的影响。 不同浓度（25μmol/L、50μmol/L 和100μmol/L ）的阿米洛利作用于PGCL3 细胞6h 后，用Transwell 小 方法： 室法检测对细胞侵袭能力和运动能力的影响。阿米洛利作用24h 后，用发色底物法检测对细胞分泌的uPA 和纤溶酶原激活物抑制 剂-1（plasminogen activator inhibitor- 1，PAI- 1）活性的变化。RT-PCR 检测阿米洛利对细胞uPA、尿激酶型纤溶酶原激活物受体 （urokinase-type plasminogen activator receptor ，uPAR ）和PAI-1 mRNA 表达的影响。Western blot 检测阿米洛利对细胞uPA、细胞外调 节蛋白激酶2（extracellular regulated protein kinase 2 ，ERK2 ）和ras 蛋白表达情况的影响。 侵袭实验和运动实验结果均显示，经 结果： 阿米洛利处理后，穿膜细胞数明显减少，在100μmol/L 时，对侵袭和运动的抑制率分别为（37.7±4.1）%和（64.9±4.9 ）%，与对照组相比 具有显著性差异（P0.01 ）。同时，细胞分泌的uPA 和PAI-1 活性降低，当浓度达到100μmol/L 时，差异具有统计学意义（P0.05 ）。从 25μmol/L 开始，阿米洛利就可显著抑制PAI-1 mRNA 的表达，当达100μmol/L 时可明显下调uPA mRNA 的表达，但各浓度对uPAR mRNA 的表达均无影响。随着阿米洛利浓度的增加，uPA 蛋白表达量逐渐减少，但对ras 和ERK2 蛋白表达量无明显影响。 阿米洛利 结论： 能够抑制高转移肺癌细胞PGCL3 的侵袭和运动，其作用机制与抑制uPA 和PAI-1 的活性和表达有关，有成为抗肿瘤转移药物的 潜力。 关键词 阿米洛利 侵袭 肺癌 尿激酶型纤溶酶原激活物 doi:10.3969/j.issn. 1000-8179.2010.05.001 EffectofAmilorideonInvasiveActivityanduPASystemofLungCarcinomaCellLine 1 1 2 XU Bin , SHI Jingwen , MAO Jianwen Corresponding author: MAO Jianwen, E-mail: jianwenmao@ 1School of Life Science and Biopharma