慢病毒介导RNA干扰SOCS3基因在猪前体脂肪细胞和成肌细胞中的表达.pdfVIP

ISSN 1007 -7626 中国生物化学与分子生物学报 20 10 7 年 月 CN 11-3870 / Q Chinese Journal of Biochemistry and Molecular Biology 26 (7 ):630 ～ 636 慢病毒介导RNA 干扰SOCS3 基因在猪前体 脂肪细胞和成肌细胞中的表达 * ， ， ， 徐成权 杨双娟 吴江维 杨公社 ( ， 7 12 100 ) 西北农林科技大学动物脂肪沉积与肌肉发育实验室 陕西杨凌 3 (suppressor of cytokine signaling 3 ，SOCS3) ， 摘要 构建细胞信号抑制因子 慢病毒干扰载体 获得有 ， ， . 感染性的病毒颗粒 感染猪前体脂肪细胞和成肌细胞 并检测其对前体脂肪细胞的干扰效率 首先 3 SOCS3 siRNA ， LentiH1 ， ， 设计并合成 对针对目的基因 的 序列 退火后连接于 上 测序验证后 与包 8. 9 vsv-g 293T ， ， 装质粒△ 和 共转染到 细胞中进行包装和浓缩 纯化后测定病毒滴度 然后感染猪前 . LentiH1-siRNA ， 3 × 体脂肪细胞和成肌细胞 重组慢病毒载体 经酶切和测序鉴定正确 病毒滴度为 107 tu / mL ， ， GFP ;RT -PCR Western 感染猪成肌细胞和前体脂肪细胞后 可见报告基因 的表达 和 印 ，