人67kD层粘连蛋白受体在毕赤酵母中的表达及活性分析.pdfVIP

卷 期 生 物 工 程 学 报 ! # ’( )! *’ )# 年 月 !$$% % !#$%% ’()*$+, (- .#(/%0$(,(12 +,(- !$$% !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 人!#$ 层粘连蛋白受体在毕赤酵母中的表达及活性分析 %’()**+,- .-/ 012+3+24 0-.54*+* ,6 789.- !#$ :.9+-+- ;)1)’2,( +- !#$% %’()*’ 8 ! 8 8 连继勤 ，戴旭芳 ，甘立霞 ，何凤田 8 ! 8 8 ， ， QR:* +1NS1E 4:R T,NHED U:* Q1NT1 E3 VO H/EDN@1E 8 第三军医大学生物化学与分子生物学教研室，重庆 #$$$M ! 重庆师范大学特殊教育学院，重庆 #$$$#% ， ， ， 8 3%4+*/5%$/ (- .#(0%5#/*2 +$6 7(,%0),+* .#(,(12 8#*6 7#,#/+*2 7%6#0+, 9$#:%*#/2 !($1;#$1 #$$$M !#$+ ， ， ! 4%0#+, =6)0+/#($ !(,,%1% (- !($1;#$1 (*5+, 9$#:%*#/2 !($1;#$1 #$$$#% !#$+ 摘 要 为实现人 层粘连蛋白受体（ ， ）蛋白的分泌表达，采用 重组技术将 9%C4 V,5E 9%C4 Q51E1E ./0/;’7 9%Q. 4*: 9%Q. 04*: 片段插入分泌型酵母表达载体;WRIKX 中，构建了相应的重组表达质粒 ;WRIKXN9%Q. 并在 UG88J 毕赤酵母菌株中表达， 每升培养基经亲和层析可纯化目的蛋白8! )J95D。纯化的目标蛋白能够与肺癌:J#K 细胞竞争性结合其配体分子Q*N8，具有 相应的生物学活性，从而为深入研究人9%Q. 的结构与功能奠定了基础。 关键词 9%Q.，毕赤酵母，蛋白质表达 中图分类号 文献标识码 文章编号 （ ） S%M : 8$$$N$98 !$$% $#N$9$!N$J （ ）， 0*2(.12 @’ 077- ’, ?/ A/07/12/ /Y;7/AA1’E ’F ?,5E 9%C4 (51E1E 7/0/;’7 9%Q. 7/0’561EE /Y;7/AA1’E ;(A513 ;WRIKXN9%Q. BA 0’EA7,0/3 6- 1EA/71ED ’F 9%Q. 04*: 1E’ -/A /Y;7/AA1’E 2/0’7 ;WRIKX ) @?/ 9%Q. ;7’/1E BA /Y;7/AA/3 ， 1E ?#0#+ 4 +/(*# F/7 1E3,0/3 6- 5/?E’( E3 6’, 8! ) J95D /(/07’;?’7/A1A ;,71- 9%Q.