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解脲支原体检测方法比较与探讨 朱秀兰 (广东省东莞市石龙人民医院，广东东莞523323) 宫颈分泌物同时进行FQ—PCK法，培养法以及ELISA法对比检测。以两种方法阳性为真阳性，两种方法皆阴性为真阴性。 ELISA法特异性和敏感性都稍差。荧光PCR法检测支原体有较好的特异性争准确性，快速，但需要特殊设备和环境，操作要求 极为严格．不能进行药敏试验。培养法也有较高的特异性，而敏感性稍差，但方法简单再加上可快速做出药敏，配合临床用药， 特另lj适合基层医院检测解脲支原体的好方法。 关键词：解脲支原体；FQ—PCR法；培养；ELISA法 解脲支原体主要寄生于人泌尿生殖道，是引起非淋菌性 循环结束反应。测定各管扩增后的荧光定量值(A)，据样品 尿道炎的主要细菌之一11。其检测方法主要有rQ—PCR法，培 养法和ELISA法。现对这三种主法诊断价值进行比较．结果为102基因拷贝恤l定量阳性质控管的荧光值)，符合该公式 报告如下。 者判为阳性，否则为阴性。 2．2培养法 1材料 标本均用标本处理后，各取50斗于液体培养基中混浊培 1．1培养基与试剂仪器 养，同时做药敏板条，一同放入CO：厢中进行培养观察。若液 珠海浪峰支原体培养基鉴定药敏试剂盒，ABT 体澄清变红为阳性，同时记下药敏。 2．3 Prism7300．中山大学达安基因股份有限公司生产和PCR荧EUSA法 光定量检测试剂盒，上海雷雨生物T程有限公司生产试剂 操作方法与结果判定按说明书进行。 盒。 2．4结果判定 1．2标本 以两种方法阳性为真阳性，两种方法皆阴性为真阴性。 534例标本源于本院皮肤科，泌尿外科和妇科病患者。男 敏感性为阳性检测结果与真阳性检测结果的比值，特异性是 性外尿道消毒后用棉试子取尿道内口2—2．5em处分泌物。女阴性检测结果与真阴性检测结果的比值。 性消毒外阴道后．取宫颈内口l-2em处柱状上皮细胞。标本 用一次性无菌塑料试管送检。 3结果 2方法 有300例，阳性率为43．8％。培养法中阳性的有284例，阴性 2．1rQ—PCR法 首先将标本离心15000rpm，10rain，弃上清，加40斗l裂解 液．旋涡震荡30s。混匀沉淀物．煮沸5min离心10000rpm， 0．01)12,31。这可能与男女生殖系统的结构差别有关。虽男性不 2rain，取41zl上清，于0．2ml反应管中，分别加入各种FQ— PCR试剂，设置不同浓度的阳性对照和阴性对照，离心数秒 够女性感染率高，但应同样重视并预防好。 后置入DNA扩增仪中进行反应。经变性，退火，延伸共32个 三种检测方法检测解脲支原体的结果比较 收稿Et期：2009-07—20 万方数据 2107 范的实验环境和特殊的仪器仪表设备与工作人员，并且不能 由上表可见，ELISA的敏感性与特异性为分别81．19％， 进行药敏试验。培养法也有高度的特异性，虽敏感性不如 88．33％。培养法敏感性与特异性分别为94．02％，100％。FQ— PCR法敏感性与特异性都皆为100％。三种方法从敏感性与FQ—PCR，但其不需要特殊的设备．操作简单，同时还可以快 特异性上考虑rQ—PCR是最高的。 速做出药敏配合临床用药。因此荧光PCR法适合于一些研究