冷冻免疫瘤苗激活的TIL对恶性黑色素瘤患者T淋巴细胞亚群的影响.pdfVIP

2005年第8卷第3期 广西中医学院学报 ·37· 冷冻免疫瘤苗激活的TIL对恶性黑色素瘤患者 T淋巴细胞亚群的影响 蒙志斌，马亦龙，康平。李志坤，欧盛秋，陈祖乾 (广西医科大学肿瘤医院，广西南宁530021) 关键词：TIL；T淋巴细胞亚群；恶性黑色素瘤；冷冻免疫瘤苗 中图分类号：R739．5文献标识码：A文章编号：1008—7486(2005)03—0037—02 近年来，肿瘤免疫疗法的进展为肿瘤综合治疗提供了新 20％正常人同血型L气K细胞培养上清，并加入瘤细胞悬液， 的希望。我们应用冷冻恶性黑色素瘤瘤苗刺激(激活)的肿 TIL浓度为1×106／“，IL-2为1000U／hd，置于37℃，5％ CQ暖箱中培养。根据细胞增殖情况，3～5天换液传代_ 瘤浸润淋巴细胞(T嗽I娟l妇tingL，髓p}10cyt∞，TlL)治疗 恶性黑色素瘤，观察患者T淋巴细胞亚群的变化，探讨TIL 细胞对恶性黑色素瘤的免疫功能的影响，现报道如下。 时应用。A、B两组均静脉输注TIL5×106詹ll，7天为1个疗 l临床资料 程。 2．2B组在输注TIL基础上加用冷冻瘤苗 1．1一般资料1998年10月～2004年7月在我院住院的 2．2．1体内冷冻免疫瘤苗的制备患者恶性黑色素瘤病灶 恶性黑色素瘤患者42例。其中男25例，女17例，年龄30～ 太大不能切除完的，切取部分瘤组织后(用于分离TIL)，不 76(53．2±6．3)岁。病程为l～2年。42例随机分成A、B两 能切除病灶用接触法、喷射法、倾注浸泡法的一种，采用包括 组。A组2l例为对照组，单纯用TIL治疗，B组21例为治疗 三个快冻慢融周期液氮冷冻破坏术。经冷冻术后的病灶作 组，TIL加冷冻免疫瘤苗治疗。两组病例冷冻免疫瘤苗均从 为体内冷冻瘤苗以激活TIL。 本院手术切除的恶性黑色素瘤组织获得，均经病理证实为恶 2．2．2体外瘤苗制备能完整切除病灶，从其中取直径0．5 性黑色素瘤。 ～1锄瘤组织，经快冻慢融三周期，制成体外瘤苗，经紫外线 1．2材料①Ⅺ)l以I．1640培养基：美国GIBCoBRL公司产 灭活消毒后，回输TIL时回植皮下以激活TIL。 品；②rIL广2(重组白细胞介素Ⅱ)：北京生物制品研究所产品； 3 T细胞亚群的检测 ③胰酶：SIGMA公司产品；④Ⅳ型胶原酶：SIGm公司产 品；⑤I型m舱酶，透明质酸酶：华美公司产品：⑥3HTcR： 两组患者均子输TIL前l周，以及输注TIL后第7天、 PPo 北京原子能研究所提供；⑦闪烁液：500“甲苯加入39 第14天、第21天分别取外周静脉血，检测T细胞亚群 (2，5．二苯基恶唑)和O．29ppop[1，4一双(5．苯基恶唑基．2 (a艿、aX、CD尊)。 苯)]；⑧淋巴细胞分离液：上海试剂二厂产品。 4结果 2方法 2．1 TIL的分离两组均取手术切除的恶性黑色素瘤组 差异无显著性意义。应用TIL后，A组cDf、∞≯、C瞄、 织，约109，