第三代慢病毒包装系统优化及Rev表达质粒对慢病毒包装效率作用初探阮峥.pdfVIP

生 物 技 术 通 讯 770 LETTERSINBIOTECHNOLOGY Vol.25No.6 Nov.,2014 doi:10.3969/j.issn.1009-0002.2014.06.004 研究报告 第三代慢病毒包装系统优化及Rev表达质粒对慢病毒包装 效率作用初探 阮峥，王文天，杨洋，段永娟，胡晓 中国医学科学院、北京协和医学院 血液学研究所血液病医院实验血液学国家重点实验室，天津 300020 ［摘要］ 目的：对目前最为常用的三质粒慢病毒包装系统进行优化，以期明确各质粒表达的病毒成分对提高慢病毒 包装效率的重要性。方法：在限定总质粒量为10 μg的情况下，将表达绿色荧光蛋白（GFP）的目的质粒、表达gag/ pol、Rev、VSVG的包装质粒按不同比例混合，转染293T细胞进行病毒包装，48 h后收集上清用于感染293T及K562细 胞，72 h后经流式细胞术检测GFP+ 阳性细胞比例，分析所获病