苜蓿中华根瘤菌和耐盐有关DNA片段的亚克隆和测序分析.pdfVIP

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2015-09-29 发布于安徽
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苜蓿中华根瘤菌和耐盐有关DNA片段的亚克隆和测序分析.pdf

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卷期微生物学报 ! %’(! 0( 年月 #$$ # !#$%’()(*($,-$ )*+,-., #$$ + / !!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!!! 苜蓿中华根瘤菌与耐盐有关?0@片段的亚克隆和测序分析葛世超樊振川陈雪松杨苏声（中国农业大学生物学院微生物学系北京） $$$8! 摘要：将苜蓿中华根瘤菌（）与耐盐有关的片段 !#$%’$()* *+,,$-$!#3 !A+.,/!?0@ 克隆在上，用0#E酶切下其#F!A+?0@片段，回收后与连接，然后 CD## 332C5G# B B 转化大肠杆菌（），筛选到转化子。将残留在上 123+%3/3$,?H=# IG# CD## F9A+.,/! B 片段连同质粒一起回收，让其自连，转化大肠杆菌，得到转化子。 0#E ?0@ G; IG$ 以为供体，的盐敏感突变株为受体，进行二亲本杂交，没有得到接合子。以 IG$ $!#3 IJ 为供体，为受体，在辅助质粒的协助下，进行三亲本杂交，筛选到接合子 IG# IJ 2K#$: B ，获得与耐盐有关的片段。将此片段连接到测序载体 I1CJL II# #F!A+0#E ?0@ B （）上进行测序。测序结果表明，该片段含有个开放阅读框（）。 M #F!A+0#E ?0@ : N2) 在此基础上再一次亚克隆，获得与耐盐有关的片段。 F8A+ ?0@ 关键词：苜蓿中华根瘤菌，耐盐，亚克隆，测序中图分类号：文献标识码：文章编号：（） O8:: @ $$$9#$8 #$$ $$$$8$ 目前，以大肠杆菌为材料所进行的渗透调节机制的研究日益深入，已相继分离和鉴定