基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在糖尿病小鼠视网膜组织中表达.pdf

中文摘要 基质金属蛋白酶及其组织抑制剂在糖尿病小鼠 视网膜组织中的表达 摘 要 目的：近年来的研究认为，细胞外基质(ECM)的代谢异 常参与了糖尿病视网膜病变的病理过程。基质金属蛋白酶 着重要作用，二者的调节平衡有利子维持视网膜的正常生理 功能，与糖尿病视网膜病变的发生发展密切相关。本实验通 过定性和半定量分析糖尿病小鼠视网膜组织中MMP一2、 膜毛细血管及其基底膜的超微结构改变，旨在对基质金属蛋 白酶及其组织抑制剂在糖尿病视网膜病变发生发展巾的作 用及其作用机制进行探讨，为临床预防、治疗糖尿病视网膜 病变提供更为确切可靠的理论依据。 db／db糖尿病小鼠，无菌条件繁殖，清洁柜内饲养，保持环 db／+型同性同窝瘦型鼠为对照，分别在2、6、9、12川龄时 注射麻醉后，摘除左眼球，迅速取视盘侧距视盘约1mill处 的1mm2面积大小的视网膜组织固定于2．5％的戊二醛磷酸 缓冲液中(PH7．6)，制作透射电镜样品，用透射EU镜观察视 网膜毛细血管基底膜的形态学改变；同一眼球的其余视网膜 中文摘要 组织后固定于4％多聚甲醛中，石蜡包埋，制成组织切片， 行HE和免疫组织化学染色，用计算机一图象分析仪对糖尿病 TIMP．2的表达情况进行平均灰度和面密度分析。(注；平均 灰度值越低，说明免疫组化信号越强；面密度值越高阳性目 标面积越大，相应的阳性细胞数越多。)同时光镜下观察 其进行免疫定位。实验数据用SAS软件处理，组间比较用方 差分析，若有显著性差异，两组问比较用q检验。 结果：糖尿病小鼠与对照组小鼠相比，普通光镜下，糖 尿病组小鼠与对照组小鼠相比视网膜各层细胞形态结构未 见异常，而且在电镜下视网膜毛细血管及其基底膜的超微结 构亦未见异常。但随病程进展，糖尿病小鼠视l列膜毛细血管 基底膜进行性增厚，内皮细胞胞质发出指状突起突向管腔。 鼠视网膜的神经节细胞层和内核层的细胞及血管内皮细胞 均有阳性表达。但随着病程进展，糖尿病小鼠视网膜神经节 中文摘要 随病程进展，TIMP一2表达的平均灰度值有显著性降低 土 为 ：O．05339土0．0041 9， 0．07354士0．00394+，0．09790 0．00943“，0．11047+0．01848螂{。同一病程阶段的 (p0．05)，而其面密度值的比值随着病程进展明显降低 9月组比较，PO．05；) 结论：随着病程进展，C57BL／KsJdb／db糖尿病小鼠视 网膜毛细血管基底膜进行性增厚。基质金属蛋白酶(MMP一2、 C57BL瓜sJ db／+$ll db／db糖尿病小鼠的视网膜巾均育阳性表 达，免疫组织化学定位均在视网膜毛细血管集中分布的视网 膜的内核层和神经节细胞层，提示它们极有可能参与J，Ⅱ三常 视网膜毛细血管基底膜和细胞外基质成分转换的过程，这非 常有助于视网膜毛细血管基底膜结构和功能的稳定，从而有 利于维持视网膜的正常生理功能。C57BL瓜sJdb／db糖尿病 小鼠在视网膜病变早期MMP．2的表达随病程进展显著下降， 中文摘要 于1：1变化为大于1：1，其面密度比值由大于1：1变化为小于 1：1的比例结合成复合物的形式抑制了MMP。2的活性，另外 又有MMP．9的表达随病程进展显著下降，结果使变性的基 底膜胶原和细胞外基质成分的降解受阻，这可能是导致糖尿 病视网膜病变早期视网膜毛细血管基底膜不断增厚的原因， 从而会进一步加速糖尿病视网膜病变的发展。 关键词：基质金属蛋白酶．2：基质金属蛋白酶．9：基质 金属蛋白酶组织抑制剂．2；糖尿病视网膜病变；免疫组织化 学 英文摘要 The ofMatrix and Expression Their Tissue