R-phycoerythrin标记抗猪瘟病毒荧光抗体的制备及其与FITC标记荧光抗体检测的比较研究.pdf

西南农业学报 2011年24卷5期 1962 SouthwestChinaJournalof Sciences V01．24No．5 Agricultural 文章编号：1001-4829(2011)05—1962-05 标记抗猪瘟病毒荧光抗体的制备及其 R-·phycoerythrin 与FITC标记荧光抗体检测的比较研究 赵守山1，颜世敢孙，朱丽萍3，崔道实1·4 (1．山东省滨州市邹平县畜牧兽医局，山东滨州256207；2．山东省农科院畜牧兽医研究所山东省动物疫病防控与繁育重点实验 室，山东济南250100；3。山东轻工业学院食品与生物工程学院。山东济南250353；4．山东齐鲁动物保健品有限公司，山东济 南250100) 摘要：用摩尔比100：1的化学交联剂SPDP分别将RPE、抗猪瘟病毒抗体衍生，两种衍生物再以摩尔比1：1液相交联，HPLC纯化 制备出RPE标记的抗猪瘟病毒荧光抗体。对制备的荧光抗体从荧光特性、抗体活性、稳定性及纯度等方面进行鉴定。以澳化氰活 化的琼脂祷微球为固相载体，采用固相免疫荧光检测法。以制各的RPE、FITC分别标记的荧光抗体检测猪瘟病毒细胞毒。结果表 明，RPE标记的荧光抗体检测阳性微球在蓝绿光激发下发射桔黄色荧光，荧光明亮．无本底光干扰，检测灵敏度高达2．67×10“ mg·mL～，是FITC标记的荧光抗体检测灵敏度的lO倍。RPE可替代FITC或与FITC等荧光染料一起用于多色荧光免疫检测。 关键词：R一藻红蛋白；荧光标记；固相免疫荧光检测；猪瘟病毒； 中图分类号：S852．659文献标识码：A and of Anti-CSFVFluorescence PreparationR—phycoerythrin-labeled Antibody Fluorescence withFITC··labeledAnti·-CSFV Comparison Antibody ZHAO Dao-shll·4 Shou-shanl，YAN Shi-gan2I，ZHUU—pin93，CUI (1Animal and Bureauof Binzhou ofAnimal and HusbandryVeterinary ZoupingCounty，Shandong256207，China；2．InstituteHusbandry LabofDisease andAnimal of Control VeterinaryMedicine，Sha