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侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、原核表达及抗血清制备.pdf
生物技术通报
·研究报告· BloTECHNoLoGYBULLETlN 2010年第8期
侵染辣椒的黄瓜花叶病毒CP基因的序列分析、
原核表达及抗血清制备
刘金亮1 王凤婷1 侯春喜2 魏毅1 张世宏1 潘洪玉1
(1吉林大学植物科学学院，长春130062；2吉林大学超分子材料与结构国家重点实验室，长春130012)
摘 要： 从吉林长春感病辣椒上获得一黄瓜花叶病毒(Cucumbermosaic
已登录的CMV外壳蛋白(coatprotein，cP)基因核苷酸序列设计简并引物，通过RT．PCR的方法克隆到了长度为657
bp的目的
系统进化树显示：38个CMV分离物可分为3个组，CMV—Cc属于CMV的IB亚组。将CMV．cc
CP基因与原核表达载体pET．
22b(+)连接，在大肠杆菌81．21(DE3)诱导表达出分子量约27
kD的融合蛋白。表达的融合蛋白经树脂纯化后免疫家兔制
备了抗血清。用间接ELISA测定抗血清效价为1／4096。Western
blotting分析表明制备的抗血清对cP有高度特异性。为准
确、快速地检测CMV奠定了基础。
关键词： 黄瓜花叶病毒．辣椒CP基因序列分析原核表达抗血清制备
ofCPGeneofCucumber
SequenceAnalysis，ProkaryoticExpression
MosaicVirus andAntiserum
InfectingPepper Preparation
Liu HouChunxi2
WeiYil Pan
Jinlian91WangFengtin91 ZhangShihon91Hongyul
(1 Sciences，Jilin 1 30062；
College∥Plant University。Changchun
2State Structureand
KeyLaboratoryofSupramolecularMaterials．JilinUR沁fs时，Changchun130012)
isolateofCucumbermosaic obtainedfrominfected in
Abstract：One virus，CMV·CC，was pepperplantsChangchun，Jilinprovince．
The
657 coat ofCMV-CCwas RT·PCR．TheobtainedCP were withse-
bp protein(CP)gene by
amplified genesequencescompared
ofCMVthatareavailableintheGenBank．ResultsshowedthattheCP ofCMV．CCsharedsimilaritv
quences
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