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紫外可见分光光谱法及其应用 光谱仪器 紫外可见分光光谱法 (Ultraviolet-Visible Absorption Spectrometry,UV-Vis)是根据溶液中物质的分子或离子对紫外可见光谱区辐射能的吸收来研究物质的组成和结构的方法,也称为紫外可见光吸收广度法。 紫外可见分光光谱法特点:仪器比较简单、价廉、分析操作也比较简单,灵敏度高、 准确度高,而且有较高的分析速度。 分光光度计的构造原理 单色束分光光度计 双光束分光光度法 双波长分光光度法 紫外-可见光吸收光谱法的应用 其应用非常之广泛:用于定量分析,定性分析和结构分析;无机和有机物的分析,配合物的组成及解离常数的测定。 以分子吸收光谱为基础的紫外-可见区分光光度分析法具有设备简单、适用性广、准确度和精密度较好等特点,已在地质、环境、能源、材料、食品等科学中发挥着重要作用,尤其是随着多元络合物、胶束增敏光度法、有机试剂等的发展,它已经成为应用最广泛的分析手段之一。分光光度法的早期应用集中在无机分析化学领域,即对为数众多的无机离子和化合物进行定性分析或定量测定。 紫外-可见光吸收光谱法在药物中的应用 大部分药物都是有机物,能够在紫外区产生吸收峰,所以紫外分光光度法是有机药物的分析测定的首选方案。 无论是有机物还是无机物,通过特定的化学反应,其产物在可见区的摩尔吸光系数都比在紫外区大。 龙井市药品检验所 鲍延丰 在通过对药物定性分析,通过与标准样品分子比较光谱的一致性,比较最大吸收波长和吸收系数的一致性及吸收度比值的一致性;来分析药物的成分。 《 吉林医学信息) ) 2 O O O年第 l ~2期 龙井市药品检验所 鲍延丰 紫外可见光分光光度法同时 测定F e( I I ) 和F e( I I I ) 昆明理工大学分析测试中心 邱林友等通过7 5 1 型紫外一可见分光光度计。Fe (I I ) 和F e (I I I ) 与邻菲啰啉及 F的络合物的最大吸收分别位干5 1 8 n m和3 7 5 n m。本文测定波长选定为5 1 8 n m和3 7 5 n m。 邻二氮菲吸光光度法测定Fe 原理: 条件: PH 绘制A-PH曲线 显色剂用量 绘制A—V曲线 显色时间 绘制A-t曲线 最大吸收波长510nm 标准曲线的制作 A-C曲线 试样样测定 以制作的标准曲线确定测物质的浓度C 配合物组成的测定 应用举例 紫外分光光度法测定蔬菜硝酸盐含量 紫外分光光度法测定莲子心总黄酮的含量 紫外分光光度法测定海红果中总黄酮的含量 紫外分光光度法测定夏枯草微丸中总黄酮的含量 紫外分光光度法测定大豆中异黄酮的含量 分光光度法在环境分析中的应用 4 ,5 二溴邻硝基苯基荧光酮与锌Ⅱ的显色发应 原理:在CTMAB 存在下,研究了4 ,5 二溴邻硝基苯基荧光酮(DBON 2 PF)与锌Ⅱ的显色反应。在p H 8 1 0 的氨性缓冲溶液中,锌Ⅱ与D-BON- PF 形成1∶2 的红色络合物 条件:该络合物的最大吸收波长为595 nm ,其表观摩尔吸光系数为6 1 87 ×10 4 ,有色络合物稳定24 h 以上;25 mL 溶液中,锌质量在0 ~10 μg 范围内符合比尔定律,选用和加入不同量的阳离子表面活性剂CTMAB 增敏,提高了方法的灵敏度和有色络合物稳定性 分析:当无阳离子表面活性剂CTMAB 存在时,显色剂DBON - PF 的最大吸收峰为520 nm ,锌与显色剂形成有色络合物的最大吸收峰为595nm ,ε= 1 1 4 ×10 4 ;当显色体系加入CTMAB 后,显色剂的最大吸收峰为550 nm ,而锌与显色剂DBON-PF 形成的络合物最大吸收峰仍为595 nm ,ε=6 1 87 ×10 4 ,吸光度明显增加,大大提高了灵敏度。 微量硫酸根离子的测定 原理:以二甲基磺基偶氮Ⅲ(二甲基3,6-双[2-磺酸苯基偶氮]变色剂)为试剂测定水中中低含量的硫酸根离子。水样中的硫酸根与试剂R-Ba络合物中的试剂离子R发生置换反应,光度法测定释出的R的吸光度,波长为644nm 因为有阳离子干扰,所以采用阳离子交换树脂在线吸附消除干扰,相对标准偏差为1.5%,测定精度在5%以内。 线性响应范围为1~14mg/L 测定废水中的铬(Ⅵ) 原理:室温下铬(Ⅵ)与苯基荧光酮在HCl-H3PO4混合酸介质中可被氧化显色,黄色的苯基荧光酮可被氧化成橙红色产物。 反应条件:最大吸收波长为492nm 线性范围0~50mg/50mL
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