Smad通路参与应力诱导颞下颌关节滑膜细胞蛋白多糖4表达的研究.pdfVIP

主堡旦膣医堂苤查!!!!生!旦箜!!鲞筮!塑g!也』!!!坐!!!!：!!!坐!翌!Q!堡：y!!：竺：塑!：1 101· ．颞下颌关节疾病研究． Smad通路参与应力诱导颞下颌关节 滑膜细胞蛋白多糖4表达的研究 徐婷吴慧玲冯剑颖谷志远 【摘要】 目的观察应力刺激对大鼠颞下颌关节滑膜细胞蛋白多糖4(proteoglyean4，PRG-4)表 达的影响，并探讨其可能的作用机制。方法将体外培养的20只SD大鼠颞下颌关节滑膜细胞分为 两组，加力组施加间歇静压力，压力值100kPa，加载频率为4h／d；对照组为未加载应力的滑膜细胞。 采用蛋白质印迹法和细胞免疫荧光技术分别在实验各时间点检测Smad通路和p38丝裂原激活蛋白 activated 激酶(mitogen proteinkinase，MAPK)通路相关蛋白的表达变化；应用转化生长因子 growth (transformingfactor，TGF)131受体抑制剂SB431542预处理后，蛋白质印迹法和实时荧光定量 PCR技术观察72 h后对照组和加力组PRG-4表达的变化。结果蛋白质印迹法检测显示，间歇静压 力作用1h后，Smad一2、一3蛋白磷酸化水平显著升高，分别在2、4h达到峰值。而在实验1、2及4h观察 p38蛋白磷酸化水平与对照组相比无明显变化。细胞免疫荧光结果显示，间歇静压力作用使Smad．2、一3 蛋白发生核转位，且胞内荧光信号比对照组明显增强(24．11±4．70)(P0．05)。实时荧光定量PCR检 测显示，间歇静压力促进滑膜细胞PRG-4mRNA的表达量(1．48±0．08)显著高于对照组(P0．05)，加 入SB431542预处理后再加力，PRG-4mRNA表达量较加力组显著降低(0．47±0．05)(P0．05)。蛋白 质印迹法检测显示，各组PRG-4蛋白表达量受抑制趋势与实时荧光定量PCR结果相一致。结论 Smad信号通路是参与调节间歇静压力诱导滑膜细胞PRG-4表达的一条重要途径。 【关键词】 颞下颌关节；蛋白多糖4； 滑膜细胞 InvolvementofSmad in 4 induced in pathwayproteoglycanexpressionbyhydrostaticpressure fibroblasts temporomandibularsynovial Xu死增+，WuHuiling，凡ng Jianying，GuZhiyuara Oraland ChineseMedical of of *Department MaxiUofacialSurgery，SchoolStomatology，ZhejiangUniversity， 310053，China Hangzhou author：Gu CorrespondingZhiyuan，Email：gzy@班edu．ca，Tel：0086—571 Toexaminethe of 【Abstract】Objective expressionproteoglycan4(PRG-4)inducedby in rat fibroblastsand the hydrostaticpressure temporomandibularsynovial investigatepossible mechanism．MethodsTheculturedrat fibroblastswere to100kPa temporomandibularsynovial subjected intermittent