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泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备.pdf
CN 263
43．1262／R中国动脉硬化杂志2005年第13卷第3期
[文章编号】 10cr7．3949(20Q5)13．03．0263．04 ·实验研究·
泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备
冯大明1。王仁1。孙文清1，郭芳1。屈顺林1，杨向东2
(南华大学医学院1．病理生理学教研室，2．心血管病研究所，湖南省衡阳市421001)
[关键词】病理学与病理生理学； 泡沫细胞相关基因4蛋白； 多肽合成； 多克隆抗体；制备
[摘要】 目的探讨制备泡沫细胞相关基因4多克隆抗体的方法。方法将从人胎肝文库经聚合酶链反应扩
增获得的泡沫细胞相关基因4基因全长cDNA序列，通过生物信息学分析，预测泡沫细胞相关基因4编码氨基酸序
列的二级结构、抗原决定簇、功能结构域，并进行了多序列比对，并根据蛋白质的亲疏水性、二级结构、偶联难度及
实验难度等，确定泡沫细胞相关基因4抗原13肽PⅪⅣKE王M冈【，RNY，采用固相多肽合成法合成该抗原片段，偶联后
经过基础免疫．6次加强免疫，经追踪检测，于第四次免疫后10—14天颈动脉放血，分离血清，冷冻抽干，一20℃保
存而制备了泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体。结果用固相多肽合成法成功制备了泡沫细胞相关基因4兔
抗人多克隆抗体，该抗体经间接酶联免疫吸附测定法检测其效价为1：16000，we或唧blot检测可见40lcDa处有目的
带，用免疫组织化学方法从He她细胞中检测到泡沫细胞相关基因4蛋白表达，证实该抗体具有较好的反应性和
特异性。结论固相多肽合成法省时、省力、制备的抗体效价高；泡沫细胞相关基因4兔抗人多克隆抗体的制备，
为进一步研究泡沫细胞相关基因4蛋白在动脉粥样硬化中的功能作用奠定了基础。
[中图分类号】R363 [文献标识码]A
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