疟原虫代谢分泌物在增强蛋白抗原免疫保护力中作用.pdf

摘 要 摘 要 疟疾是由疟原虫引起的，是最严重的传染病之一，每年导致 100 万人死亡， 目前 109 个国家正遭受疟疾感染的危险。疟疾是由按蚊传播，随着叮咬人体而 将疟原虫注入人体血液循环中，它可以导致低血糖症、发热、贫血等临床症状。 目前有四种人疟和四种鼠疟，其中夏氏疟原虫是研究恶性疟原虫最佳的小鼠模 型。 目前研发的用于抵抗疟疾的疫苗种类有很多，亚单位疫苗是研究最多的。 它可以引起很强的体液免疫，但细胞免疫较弱，不能引起持久的免疫保护力。 亚单位疫苗需要佐剂的辅助来增强免疫反应。MSP1 是最重要的亚单位候选疫 苗，可以引起一定的保护力。它经一系列切割最后只剩 C 端 19kDa 经 GPI 连接 在虫表面并进入红细胞中。有前人报道发现从疟原虫体外培养的上清中有某些 物质可以与疟疾感染的病人的阳性血清发生作用。 因此本实验我们想研究 MSP1 和疟原虫培养上清共同免疫的效果。首先利 用大肠杆菌表达系统获得夏氏疟原虫 AS 株 MSP1 蛋白 C 端 11kDa；其次体外 短期培养夏氏疟原虫获得代谢分泌物(ES) 。将 MSP1 与代谢分泌物共同免疫小 鼠，检测感染率、ELISA 检测抗体滴度；免疫小鼠的脾细胞培养，研究细胞因 子的分泌和细胞激活状态。实验发现：(a)MSP1 以ES 为佐剂免疫可以有效抑制 血虫水平；产生较高的抗体水平，主要有 IgG1 、IgG2c 和 IgG2b ；(b) 激活了树 突状细胞，使 CD40、CD86 分子表达升高，MHC-II 表达下降；(c)激活了 CD4+T 细胞，使其表面分子 CD62L 表达下降；(d)诱导淋巴细胞的增殖，产生较高的 IFN- γ、IL-12 和 IL-10 。本研究第一次将代谢分泌物作为新型佐剂。我们的研 究结果揭示了抗疟疾免疫诱导的复杂机制，并可能对疟疾疫苗的研发具有重要 意义。 关键词：疟疾疫苗 佐剂 夏氏疟原虫 MSP1 代谢分泌物 免疫保护 I Abstract ABSTRACT Malaria caused by infection with Plasmodium parasite is one of the most serious infectious diseases, which causes 1 million deaths every year. At present, more than 109 countries of the world are suffering from the risk of malaria infection. Malaria is transmitted by Anopheles, which bite human body and inject the parasites into blood circulation. Malaria infection causes severe clinical symptoms including anemia, hypoglycemia and fever. There are four species of Plasmodium that infect human. The rodent malaria parasite, Plasmodium chabaudi, is one of the model to study the Plasmodium falciparum infection. Many vaccines against malaria are currently developed, among which subunit vaccines are most studied. The subunit vaccines can induce strong humoral immu