甘蔗黄叶病毒P0基因的克隆与原核表达及抗血清制备.pdfVIP

2014年 中 国 糖 料 第2期 ofChina SugarCrops 1 }试』验l研l究l 文章编号：1007—2624(2014)02—0001—03 甘蔗黄叶病毒PO基因的克隆与原核表达及抗血清制备 邹游兴，刘向蕊，王洪星 (海南大学应用科技学院，儋州571737) DNA片段。以pET32a(+)原核表达载体，构建重组表达质粒pET32a—P0。经过双酶切鉴定和DNA测序后，将重组 表达情况。表达结果显示，在该表达系统中，融合表达蛋白P0是以包涵体形式的蛋白存在：P0融合蛋白大小约45 kDa，与P0开放阅读框的理论推算值29．991kDa加上载体自身蛋白约18kDa相符．用Niz+-NTA琼脂糖亲和层析 纯化融合蛋白，免疫家兔制备出抗血清，通过酶联法(ID—ELISA)酒1定本实验制备的ScYLY—P0抗血清工作浓度为 1：25000。 关键词：甘蔗黄叶病毒；沉默抑制子；原核